关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

反相离子对色谱法建立的注意事项(三)

月旭科技
2022.11.17
981644b3a3f7c29b50ea065155923622.gif152cba884b07beb005a55c42af643138.jpeg

(图片来源:包图网)

往期推荐

● 浅谈离子对色谱法

● 添加离子对试剂,别忘了这些问题

● 反相离子对试剂什么时候使用?

● 反相离子对色谱法建立的注意事项(一) 

● 反相离子对色谱法建立的注意事项(二)

大家看过之前的文章后,对反相离子对色谱法已经有很清晰的认识了,今天小编为大家分享一个实际案例:


甲酰胺等6种物质的分离

5fad0d98136e2cb0bbed7e36a7415a85.jpeg

初始条件

色谱柱:Ultimate® LP-C18(4.6×250mm,5μm)。

流动相:0.1%七氟丁酸溶液/乙腈;

检测波长:210nm;

柱温:30℃;

流速:1mL/min;

进样量:10μL。

色谱图

54d9394af1c3b1d0a22fa11fd474ed1e.jpeg

讨论:

甲酰肼与4-氨基三氮唑合并,3-氨基三氮唑峰前有倒峰干扰,三氮唑峰型不好,甲酰胺与二甲酰肼分离度未基线分离,增加离子对试剂浓度

流动相:0.3%七氟丁酸溶液/乙腈

色谱图

f91261f8f191594d149011749fa01461.jpeg

讨论:

增加离子对试剂浓度分离效果和基线都得到很好的改善,但约9分钟处有倒峰,甲酰胺与二甲酰肼分离度未基线分离,增加离子对试剂中碳原子的数量

流动相:10mmol/L KH2PO4(含1g/L辛烷磺酸钠,pH1.6)/乙腈=85/15 

色谱图

6fc442e6ca13a3749f85a2d505ba68f4.jpeg

讨论:

改用辛烷磺酸钠以后无改善,改变离子对试剂种类

流动相:10mmol/L KH2PO4(含2g/L己烷磺酸钠,pH1.5)/乙腈=90/10

色谱图

5a59362d0031c514d599335d49b7b5f3.jpeg

讨论:

第一,二个峰分离良好,其他物质需要改善,整有机相的比例

流动相:10mmol/L KH2PO4(含2g/L己烷磺酸钠,pH1.5)/乙腈=95/5

色谱图

36378431013a88b4fc226e3743095d23.jpeg

测试结果:

保留及分离情况均良好,分离完全,三氮唑峰形能满足峰面积定量要求。

讨论:

在分离甲酰胺等6个物质时,这几个均为极性较大,反相色谱上保留弱,要达到六个成分的分离,首先需增加其保留,再根据情况,调整离子对试剂的量,pH值,有机相种类与浓度以达到分离,在实验中选择了耐受强酸条件的Ultimate® LP-C8(pH耐受范围0.5-8)柱,通过调整离子对试剂的种类,浓度,有机相的比例,使得各物质得到良好的分离,满足日常检测需求

如果您想了解更多内容,欢迎联系月旭科技销售人员或拨打400-810-6969服务热线,我们将竭诚为您服务。

月旭科技 / 企业战略定位

中国领先的色谱填料、色谱耗材和仪器制造商,色谱分析和分离纯化整体解决方案提供商,色谱实验用品一站式供应商。

月旭科技 / 企业文化

企业 ·使命

让公众的饮食健康更有保障

企业 · 精神

积极开拓进取,努力创造价值

企业 · 理念

极限的性能,合理的价格,最好的服务

核心 · 价值观

客户优先,团队至上

学习创新,攻坚克难

诚信尽责,红利共享

c672c9e9dbe0aab4052c01835823c61c.gif

推荐
关闭