LC-MS/MS在多肽，抗体，核酸赛道的应用

基泰生物

2023.8.21

LC-MS/MS在多肽，抗体，核酸赛道的应用

随着LC-MS/MS在蛋白/多肽，寡核苷酸，单抗和抗体药物偶联物(antibody-drug conjugate，ADC)三类热点药物定量方案上的成熟，LC-MS/MS已成为生物技术药物不可替代的检测工具。和传统的酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）方法比较，LC-MS/MS有更好的方法专属性，更宽的线性范围，方法开发更快速等优点。

蛋白/多肽类药物，分子量一般<10,000 Da，灵敏度要求高，所以通常需要比较专属性的前处理和质谱采集技术来消除杂蛋白干扰。对于多肽杂质，多肽分子量测定，多肽表征等，LC-MS/MS都可以检测。

合成多肽分析解决方案

多肽药物生物样品的分析思路

多肽类药物分析

寡核苷酸是一类20个左右碱基的短链核苷酸的总称(包括脱氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA内的核苷酸)，通常分为反义寡核苷酸（ASO）、小干扰RNA药物（siRNA）、含CpG基元的寡核苷酸（CpG- ODN）、核酸适配体和小核苷酸（MicroRNA，miRNA）等。

LC-MS/MS技术对寡核苷酸药物具有高灵敏度、高选择性、能够区分 5’端和 3’端的缩短代谢物的优势，成功的寡核苷酸类药物需要良好的体内代谢稳定性，在药物报批中，往往会特别关注寡核苷酸类药物的代谢物。这就需要先鉴定代谢物，然后依据报批规则，可能需要对主要代谢物定量，LC-MS/MS可以同时定量原药及其代谢物。其中，代谢物的鉴定，往往使用高分辨质谱，特别提到的是：寡核苷酸药物需要使用质谱仪的负离子模式进行检测，需要质谱仪良好的负离子响应，这一点同蛋白药完全不同。

小核酸药物分析方案

寡核苷酸分析和实验室级纯化

寡核苷酸小科普

单抗和ADC药物。单抗药物的分子量一般为150 KDa, 分子量较大，通常使用ELISA方法测定；但在临床前实验中，LC-MS/MS常常作为ELISA的互补验证方法而使用；LC-MS/MS经典的检测流程是：免疫捕获后，酶切，LC-MS/MS检测特异性肽段完成定量。

抗体/蛋白药物分析解决方案

抗体药物质量分析

重组抗体药物的质量控制

ADC药物是一类由单克隆抗体和小分子细胞毒素通过化学偶联子连接起来的新型药物。由于ADC的复杂性，其药代动力学研究中需要监测多种分析物，主要包括：结合型抗体、总抗体、结合型小分子化合物、游离小分子化合物及其代谢物，有时还会对抗体药的抗体进行检测（anti-drug antibodies，ADA）。结合型抗体、总抗体和ADA的测定，主要使用ELISA方法测定；结合型小分子化合物、游离小分子化合物及其代谢物，主要使用LC-MS/MS方法测定。

液质联用在ADC分析中的应用

ADC非临床研究难点有哪些？

ADC药物分析方法