如何分离核酸蛋白和有机物
CTAB法的全称是十六烷基三甲基溴化铵法。具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，但不会沉淀核酸。再通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后，加入乙醇沉淀，即可使核酸分离出来。
(1) 2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。
(2)取少量实验材料(约300mg)置于研钵中，用液氮磨至粉状;
(3) 加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液，轻轻搅动;
(4) 将磨碎液分倒入1.5 ml的灭菌离心管中，磨碎液的高度约占管的三分之二;
(5)置于65℃的水浴槽或恒温箱中，每隔10 min轻轻摇动，30~60min后取出;
(6)冷却2 min后，加入氯仿-异戊醇(24:1)至满管，剧烈振荡2~3 min(若提取的是总基因组，则不能剧烈震荡。)，使两者混合均匀;
(7)放入离心机中10 000 rpm离心10 min，与此同时，将600 ul的异丙醇加入另一新的灭菌离心管中;
(8) 10 000 rpm离心1 min后，移液器轻轻地吸取上清夜，转入含有异丙醇的离心管内，将离心管慢慢上下摇动30 sec，使异丙醇与水层充分混合至能见到DNA絮状物;
(9)10000 rpm离心1 min后，立即倒掉液体，注意勿将白色DNA沉淀倒出，将离心管倒立于铺开的纸巾上;
(10)60 sec后，直立离心管，加入720ul的75%乙醇及80 ul 5 M的醋酸钠，轻轻转动，用手指弹管尖，使沉淀与管底的DNA块状物浮游于液体中;
(11)放置30 min，使DNA块状物的不纯物溶解;
(12)10000 rpm离心1 min后，倒掉液体，再加入800 ul 75%的乙醇，将DNA再洗 30 min;
(13)10000 rpm离心30 sec后，立即倒掉液体，将离心管倒立于铺开的纸巾上;数分钟后，直立离心管，干燥DNA(自然风干或用风筒吹干);
(14)加入50 ul 0.5 × TE(含RNase)缓冲液，使DNA溶解，置于37℃恒温箱约15 h，使RNA消解;
以上为通用CTAB法,实验时可根据不同材料加以改进,以获得最佳实验结果.
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