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利用96孔板和酿酒酵母生长圈复合筛选高产管囊酵母

2019.10.26

摘要: 野生酿酒酵母不能利用木糖作为碳源,但是可以利用乙醇作为碳源和能源。管囊酵母可以利用木糖生产乙醇。酿酒酵母可以利用管囊酵母生产的乙醇作为碳源。本研究将管囊酵母进行紫外诱变后,利用96 孔板培养,选取OD 值较高的孔进行酿酒酵母生长圈筛选。管囊酵母在木糖(5 %)为唯一碳源的YNB 培养基上生长并产生乙醇。产生的乙醇越多,指示菌酿酒酵母的生长圈相对越大。利用酿酒酵母生长圈法筛选的正变率为35.22 %,筛出1株菌UV171,乙醇产量为10.7 g/L,比对照高25.9 %,对菌株UV171 进行稳定性实验,传至3 代其产量稳定。

     由于化石燃料的不可再生性、短缺性以及污染性,作为生物燃料的乙醇的研究逐步显得重要。在纤维素水解液中,木糖约占了单糖的30 %。如果将水解液里面的木糖充分利用, 那么木质纤维素乙醇生产的成本将会降低约20 %[1]。因此,得到高效利用木糖产乙醇的菌株变得尤为重要。目前发酵木糖产乙醇的微生物主要有基因工程菌和天然微生物两种。一般后者代谢木糖产乙醇的效率较前者低[3]。但天然微生物的稳定性有利于提高工艺的可靠性,本文采用了96 孔板方法,结合酿酒酵母生长圈法对管囊酵母紫外诱变后的突变株进行定向筛选, 并研究了酿酒酵母生长圈和管囊酵母菌落两者直径的比值i(ds/dp)与管囊酵母乙醇生产能力的关系。


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