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石墨炉原子吸收法直接测定末梢血中锰

2018.7.03

  人体中有很多的微量元素,其各自都有自身的作用,锰就是其中之一。其可在人体中参与各种生理代谢,发挥很关键的作用。但如此微量元素在人体中表现为过量的时候,其又会对人体产生很大的伤害,其可对人体的神经有一定的伤害。人体会出现锥体外系受损、震颤性麻痹症候群等表现〔1〕。所以对从事此方面工作的人员应进行定期的检查,以了解其体内此微量元素的指标,出现问题及时处理,避免对其有重大的伤害。对此微量元素进行检查多使用石墨炉原子吸收法进行检查〔2-6〕,但在操作中基体改进剂的加入会造成一定程度的锰污染,所以本人提出使用硝酸-Triton溶液稀释血样,混匀后直接上机测试,结果令人满意。 
  1 仪器及试剂仪器 
  美国PE公司PEAA300原子吸收光谱仪(横向加热石墨炉技术,带氘灯背景较正)及锰空心阴极灯,平台石墨管,Mn空心阴极灯(北京有色金属研究总院)。试剂:硝酸:优级纯,Mn标准溶液,国家标准物质研究中心提供;应用高纯水进行此项检查。进行检查前所有仪器均进行消毒处理。 
  1.1 标本的采集过程 首先对患者进行血液标本的采集,第一滴血去掉之后再进行采集。血液标本应采集足够,大概40μl左右。采集之后妥善进行保存,并进行充分地混匀处理,4℃保存,1周内测定。 
  1.2 进行检查的环境 根据仪器的说明书进行相关检查,可应用三种浓度进行检查,分别为1μg/L,5μg/L,10μg/L,在进行检查期间应重视各项环境的标准,重视检查的温度。 
  1.3 分析步骤 将Mn标准溶液(GBW080157)梯度稀释,用硝酸-Triton溶液配制成标准浓度为10ug/L的使用液。设置仪器稀释参数。由仪器自动计算,稀释出标准系列1,3,7,9ug/L,并用自动进样器吸取20μl注入石墨管中,在优化的实验条件下,经过干燥、灰化、原子化,检测待测元素的原子吸收信号。仪器工作条件波长:279.5nm;灯电流:15mA;峡缝:0.2nm;进样量:20μl;保护气:Ar,原子化时停气;氘灯背景较正;两步干燥,斜坡升温。 
  1.4 标准曲线以稀释液为试剂空白,将预先配好的10μg/L的标准应用液加入样品杯,依次放进样品盘中,经仪器自动依次稀释成标准系列0,1,3,7,9μg/L,在上述仪器条件下测定,自动绘制标准曲线。 
  1.5 样品测定取处理好的上清于样品杯中,依据编号置于样品盘中;另外以稀释液为样品空白(共5个),相同条件下测定。 
  1.6 计算结果最终结果为:C=m×10式中:C为样品最终浓度(μg/L),m为样品测定值减去样品空白值。 
  2 方法的准确度 
  2.1 加标回收试验取5份样品测定时各加入4μg/L的标准5μl,回收率在95.0%-105.0%之间,平均回收率为99.2%。 
  2.2 锰标样测定将国家标准物质中心提供的标准物质稀释至4μg/L,经过50次测量,结果为4.04±0.51μg/L,经检验与参考值差异无统计学意义。 
  2.3 方法的精密度。随机抽取3个样品,各测量10次,变异系数(CV)依次为4.6%,5.3%和3.4%。 
  3 讨 论 
  3.1 本文比较了平台石墨管和热解涂层石墨管,发现平台石墨管灵敏度3倍于热解涂层石墨管而且相对标准偏差明显优于后者。在自动进样过程中,要注意观察进样样品必须加入平台中。 
  3.2 现今,我国有明确的职业病诊断的标准,根据标准中的锰的检查指标来对患者进行诊断和治疗。对患者进行头发和尿液的检查只能提示患者有此方面的疾病考虑,并不可以对患者进行确诊,对患者进行血液的检查可有很高的诊断意义。患者的血液中锰的含量指标可表现出患者的人体中的毒量〔7-9〕。此项检查可对诊断有很大的辅助作用。可是现今我国还没有明确相关的标准。相关研究〔2-4〕显示可使用多种的试剂来让检查的诊断率有所提高,这些试剂都有其自身的优势。本文对此进行了石墨炉原子吸收分光光度法测定血锰探讨,经过实验,采用硝酸-Triton稀释后直接进样测定,精密度、准确度实验,样品分析变异系数在3.4%-5.3%之间,回收率在95.0%-105.0%之间,方法的灵敏度高,快速简便。本方法将末梢血经过稀硝酸稀释后,直接进样,简化了前处理操作和降低了外来污染。使工作量大大减少,分析时间缩短,提高了对实验人员的保护。 

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