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食用真菌的液体培养和固体栽培实验——固体栽培

2019.4.08

实验材料	侧耳（ Pleurotus ostreatus 俗称平菇、北风菌等）
试剂、试剂盒	酵母膏麦芽汁琼脂棉籽壳培养基
仪器、耗材	550 ml 罐头瓶
实验步骤	1. 配料、装瓶和消毒 3 个 550 ml 罐头瓶按比例称好 330 g 棉子壳培养基，依法配制及时装瓶。底部料压得松一些，瓶口压紧些，中间扎一直径约 1.5 cm 洞穴，用牛皮纸及时扎封瓶口，128℃ 消毒 1.5～2 h。大生产也可用常压灭菌，100℃，6 h。 2 接种培养待培养基温度降至 20～30℃ 时，用大口无菌吸管于中部接进摇瓶种子 5％或均质悬浮液 3％，培养基表面稍留点。扎好牛皮纸移入培养室。也可接种液体一麦粒栽培种，种子若系普通固体栽培种，则应去除表面老化菌丝，接种 5％以上。 3. 栽培管理 3.1 发菌（spawnrunning）即菌丝在营养基质中向四周的扩散伸长期。室温控制在 20～23℃ 相对湿度 70％～75％。7 d 以后菌丝伸长最快，室内 CO₂ 浓度升高。要早晚各通一次风，保持空气新鲜，约 25～30 d 菌丝可长满全瓶，及时给予散射光照，继续培养 4～5 d，让其达到生理成熟。菌丝繁殖时，瓶内实际浓度一般高于室温 4～6℃，瓶内温度不应高于 29℃。侧耳菌丝在黑暗中能正常生长，有光可使菌丝生长速度减缓。 3.2 桑椹期菌丝成熟后给予 200 Lx（勒克斯）左右散射光照，将瓶子移至 12～20℃ 培养室进行周期低温剌激，一般 3～5 d 后瓶口内略见空隙和小水珠，产生瘤状突起，这是子实体原基，叫原基（primordium）形成期，形似桑堪，故又称桑椹期，适当通风，相对湿度要求 80％～85％，低温刺激，促进原基形成，温差达 8～10℃，一般可用室内外温差来调节。光照强度必须在 50 Lx 以上散射光，一般在 200 Lx 左右，凤尾菇（P.sajor-caju）要求 250～1500 Lx 散射光才能出现原基。 3.3 珊瑚期原基分化，形成菌柄，菌盖尚未形成，小凸起各自伸长，参差不齐，状似珊瑚。条件合适，只要 1 d 桑椹期就能转入珊瑚期，湿度控制 90％左右，通气量也要逐步加大。 3.4 幼蕾期菌盖已形成，菌褶开始出现。保持 90％左右的湿度，18～20℃ 温度培育。同上述散射光，通风良好。 3.5 成熟期当菌盖充分展开，菌盖下凹处产生茸毛，即要立即不留茬基釆收。从菌蕾发生到釆收约需 7～8 d。采收后，瓶口内如有杂物或死菇等要清除掉、再包上牛皮纸，继续培育。约 10 d 左右，瓶口的料面上又会发出小菇蕾，再打开牛皮纸继续进行湿度、温度、通风和散射光的管理，大约 7～10 d 又会出现一批菇蕾。第二批菇釆光后，料内水分、养分消耗太多，此时应补水和追加营养硫酸铵酒石酸溶液，浸没在该溶液中一昼夜，挤干水分，再包上牛皮纸，很快又能出第三茬菇。每次采下的鲜菇即称重量，总量按公式计算生物学效率（一定含水量于实体鲜重/基质干重 ×100。）三荏菇以后，菇潮不能再成批出现，而是变成零星发生了。侧耳子实体的分化和发育必须有散射光，黑暗下不产生子实体，直射光不利于子实体的形成与生长。相对湿度在 55％时子实体生长缓慢，40％～45％时小菇干缩，高于 95％时菌盖易变色腐烂等。适宜的温度范围，子实体发育快。个大、肉质厚；温度低则生长慢、个小、肉质薄，缺氧不利于子实体形成。应适时采收，晚了食品性差，且大量担孢子落到培养料上也影响下茬菇的生长。展开