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简述单克隆抗体技术的基本原理

2022.3.16

  哺乳类细胞DNA合成可分为两条途径,①从头(de novo)合成途径,利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶,可被氨基蝶呤(A)阻断;②补救(salvag-e)合成途径,在次黄嘌呤磷酸核糖转化酶( HGPRT)存在下利用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)。

  单克隆抗体技术的流程为:脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)作用下发生细胞融合;加入HAT选择培养基(含H、A和T)后,未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断,而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA,从而死亡;未融合的脾细胞难以在体外培养而死亡;融合细胞因从脾细胞获得HGPRT,故可在HAT选择培养基中存活和增殖。

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