原核细胞体外翻译系统
实验材料 | 适用于杯状 DNA 的 S30 提取物 适用于线状 DNA 的 S30 提取物 适用于环状 DNA 的 T7S30 提取物 |
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试剂、试剂盒 | 无核酸酶的水 [35S] 标记的甲硫氨酸 1 mmol L 缺少中硫氨酸的氨基酸混合物 缺少氨基酸的 S30 反应混合液 |
仪器、耗材 | —70℃ 冰箱 微量移液器 离心机 冰浴 |
实验步骤 |
―、材料与设备 展开 |
注意事项 |
1)DNA 用量的优化。逋常,一个反应体系屮不应包含超过 4ug 的 DNA。因为随 DNA 的不断增加将会导致较多的未掺入标记氨基酸的目的蛋白的产生、从序列内部起始翻译反应的增加以及过¥结朵翻译的产物的不断增加。 展开 |
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