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蛋白质自动测序仪的基本结构

2022.8.30

  蛋白质自动测序仪结构非常复杂,基本组成构件包括反应器、转换器、进样器、氨基酸分析系统和信息软件处理系统[1]。

  反应器反应器中进行 Edman化学降解反应中偶联反应和环化裂解反应。在偶联反应之前有一个样品固定过程,即将蛋白质样品固定在纤维板上或将转印有蛋白质斑点的聚偏二氟乙烯膜(FVDF)放置在反应器中,反应条件要求一定的温度、时间、液体流量等,由计算机系统自动调节控制这些因素:在反应器中蛋日质成多肽经过偶联和环化裂解反应形成ATZ衍生物[1]。

  转换器ATZ衍生物在转换器中经有机溶剂(如氯丁烷)抽提出来,再经25%TFA溶液作用转换成稳定的PTH氨基酸。

  进样器 PTH氨基酸由有机溶剂(如乙腈)溶解后经进样器注入HPLC。

  氨基酸分析系统 通常由高效液相色谱毛细管色谱柱组成,色谱柱分离是整个测序过程中最为关键的一步。影响色谐柱分离结果的因素有液体分配速度、温度、电压、电流等。因此,仪器配有稳压、稳流、自动分配流速装置。各种氨基酸通过这一系统会产生自己的特征吸收峰。

  信息软件处理系统 由计算机主机完成:记录和显示数据,根据氨基酸的层析蜂来判断为何种氨基酸。它提供测序需要运行的参数:时间、温度、电压及其他循环状况,并可实现跳跃和暂停步骤。

  以上为蛋白质自动测序仪的主要部件,在此之外还有蛋白质或多肽的纯化处理配件及整个测序过程必备的试剂和溶液[1]。

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