实验室分析仪器--液相色谱仪色谱柱常见问题四十四
使用的氨基柱时,有时候峰型突然变宽,有拖尾,用一段时间就又好了,不明白是什么原因造成的,如果要再生氨基柱的时候应该怎么做呢?是像您先前回答的问题中提到的,用一定比例的氨水冲洗吗?氨基柱可以直接用纯水冲洗吗?记得当时买的氨基柱那个使用说明书上说不能用纯水冲?是这样的吗?如果可以冲的话,一般冲多久?
答:氨基柱的硅胶孔内的氨基浓度非常高(大约有 1mol/L),在有水存在的时候,在孔内形成一个 pH10 左右甚至超过 10 的很强的碱性小环境,并会导致硅胶基体慢慢溶解。不过硅胶基体的溶解会生成酸性的硅醇基,又会降低孔内的 pH 值,延缓硅胶基体的溶解进程。一段时间后,两个相反的过程会达成一个动态平衡,从而稳定下来。对你问题提到的这个现象,我想到的是这个原因。
氨基柱,要看氨基柱的应用模式,是正相还是 HILIC?这两种模式的情况是大不相同的。正相使用,一般很怕有水。但 HILIC 模式应用,一般流动相是乙腈 / 水,是不怕水的。不过键合氨丙基基团非常容易水解,所以一般氨基柱不适宜保存有水的溶剂中。作为正相应用时,流动相中要求一点都不能含水,但清洗柱子上的污染物质,是可以含水的,因为水有强极性,在正相色谱上洗脱能力极强,当然不必用 100% 纯水。氨基柱具体冲洗方法,正相条件按照正相硅胶柱的清洗方法,HILIC 模式按 C18 柱的清洗方法。
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