ASTM E2694-09由美国材料与试验协会 US-ASTM 发布于 2009。
ASTM E2694-09 在中国标准分类中归属于: E39 液压油液。
该方法测量样品中 ATP 的浓度。 ATP 是所有活细胞的组成部分,包括细菌和真菌。因此,ATP 的存在是金属加工液中微生物污染总量的指标。 ATP 与非生物来源的物质无关。方法 D 4012 验证 ATP 作为可培养细菌数据的替代品(指南 E 1326)。该方法与方法 D 4012 的不同之处在于,它消除了历史上导致 ATP 测试无法用于复杂有机流体(例如 MWF)的干扰。 ATP 测试可提供反映样品中总生物负载的快速测试结果。因此,它减少了测试启动和数据采集之间的延迟,从可培养菌落变得可见所需的 36 小时到 48 小时(或更长时间)缩短到大约五分钟。尽管 ATP 数据与 MWF 中的培养数据有很大的共变性,但影响 ATP 浓度的因素与影响可培养性的因素不同。可培养性主要受到捕获的微生物在特定生长条件下在所提供的生长培养基上增殖的能力的影响。据估计,在任何给定的生长条件下,环境样本中存在的物种中只有不到 1% 会形成菌落。 ATP 浓度受以下因素影响:存在的微生物种类、这些种类的生理状态以及总生物负荷(参见附录 X1)。物种效应的一个例子是,真菌的每个细胞的 ATP 量明显多于细菌。在一个物种内,代谢更活跃的细胞比休眠细胞拥有更多的 ATP。总生物负载越大,样品中的 ATP 浓度就越高。冲洗步骤(11.15)可能无法消除所有可能干扰生物发光反应(11.39)的化学物质。任何此类干扰的存在都可以通过执行附录 X3 中所述的标准添加测试系列来评估。干扰化学物质的任何影响都将反映为相对于从不含干扰化学物质的流体中获得的数据的偏差。
1.1 该方法提供了一种用于捕获、提取和定量与水混溶物中发现的微生物相关的三磷酸腺苷 (ATP) 含量的方案金属加工液(MWF)。
1.2 使用生物发光酶测定法测量 ATP,产生的光量与样品中 ATP 浓度成正比。光以相对光单位 (RLU) 的形式定量产生和测量,通过与 ATP 标准品比较并计算为 pg ATP/mL 进行转换。
1.3 本方法同样适合在实验室或现场使用。
1.4 该方法检测的 ATP 浓度范围为 4.0 pg ATP/mL 至 400,000 pg ATP/mL。
1.5 如果可以克服干扰,生物发光是一种可靠且经过验证的 ATP 定性和定量方法。该方法不区分不同来源的 ATP,例如来自不同类型微生物(如细菌和真菌)的 ATP。
1.6 SI 中规定的值应被视为标准值。
1.7 本标准并不旨在解决与其使用相关的所有安全问题(如果有)。本标准的使用者有责任在使用前建立适当的安全和健康实践并确定监管限制的适用性。
理论板数按供试品溶液色谱图中三磷酸腺苷峰计算不低于1500,各色谱峰之间的分离度应符合要求。测定法精密量取供试品溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,按下式(1)计算,除一磷酸腺苷和二磷酸腺苷外的其他杂质不得过1.0%;按下式(2)计算,杂质总量不得过5.0%。...
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