UniGel高载量离子交换介质的特点和应用（二）

2020.4.28

柱效测定

装好的色谱柱应使用 2 BV 0.5 M NaCl 溶液平衡，再用 2.0 M NaCl 以 100 cm/h 流速进行柱效测试，具体测试参数详见下表：

存储条件

暂时不使用的层析介质需保存在 4～35 ℃ 的 20%乙醇中，并盖紧瓶盖，已经装好层析柱应保存在含 20%乙醇的缓冲液(pH 7.0)中。

清洗方法

为了保持层析柱的性能，若有蛋白质或其他杂质在再生过程中未能有效去除，可执行在位清洗步骤，在位清洗时，也可采用反向冲洗的方法，具体操作步骤如下：
（1）对于通过离子键结合过强的蛋白，可用 3 BV 以上的 2 M NaCl 清洗，并用 3 BV 以上的去离子水清洗；
（2）对沉淀蛋白、以疏水性结合的蛋白或脂蛋白，可用 0.2~0.5 M NaOH 清洗（与层析介质接触时间 1~2 小时），并用 5 BV 以上平衡液和 3 BV 以上的去离子水清洗；
（3）对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用 5 BV 以上的 50%乙醇或 30%异丙醇清洗（与层析介质接触时间 0.5-1 小时），并用 5 BV 以上的去离子水清洗。也可用含非离子表面活性剂的碱性或酸性溶液清洗，如用 0.1~0.5%的 Triton X-100 + 0.1 M 乙酸清洗 1-2 小时，并用 5 BV 以上的 50%乙醇冲洗去除去污剂，然后用 5 BV 以上的纯水冲洗（使用高浓度的有机溶剂时，为了避免产生气泡，应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法）。

再生方法

每次层析之后可用 0.5-2 M NaCl 清洗层析柱，除去强结合于层析介质上的蛋白。

UniGel系列载量测试

UniGel系列产品的优势就是高载量高流速，通过对比同类产品，我们可以更直观了解UniGel系列的载量优势。

1.UniGel与传统离子交换介质

动态载量的对比