什么是realtime-PCR溶解曲线
如图所示,这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读:1、随着温度的升高,DNA双链断裂;接着温度降低,到达退火温度的时候,DNA双链复性,荧光分子绑定在DNA双链上,所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度,继续升温,双链断开,DNA分子溶解。请注意溶解曲线的纵坐标,表示单位时间内荧光信号的变化量。当扩增产物特异,是单一产物的时候,这个纵坐标峰值所对应的横坐标应该是一致的,即呈现单一的溶解峰,这个时候,在同样的温度下,可以认为是产物相同;如果溶解峰不单一,就意味有非特异性扩增。
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