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培养细胞不贴壁可能是什么原因

2021.9.29

培养细胞不贴壁的原因可能如下:
1.支原体污染.
2.培养瓶瓶底不干净.
3.培养液pH
值过碱(NaHCO3
分解).
4.消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当.
5.细胞老化(如传代前细胞已汇合导致失去贴附性).
6.接种细胞起始浓度太低或太高.
建议解决方法:
1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度.
2.分离培养物,检测支原体.清洁支架和培养箱.如发现支原体污染,丢弃培养物.
3.注意刷洗,或换用一次性塑料培养瓶.
4.使用无菌醋酸溶液调整pH
值或充入无菌CO2(将培养液敞口放入培养箱也可).
5.重新配置消化液或培养液.
6.启用新的保种细胞.
7.调节最佳接种细胞浓度.

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