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HPLC前处理-过滤颗粒物来源

2020.7.13

目前,HPLC已成为不可或缺的分析仪器。为了提高数据的可靠性和延长HPLC寿命,过滤是相当必要的。下面围绕液相前处理过滤时颗粒物主要的三种来源进行说明。

一、过滤的必要性

任何颗粒物进入HPLC系统后都会在柱子入口端被筛板挡住,最后的结果是将柱子堵塞,表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此,要采取各种预防措施,包括操作步骤和仪器自身的各种过滤设计,尽量减少颗粒物进入HPLC系统中,从而延长仪器和色谱柱的使用寿命,并提高数据的可靠性。

二、颗粒物的主要来源

颗粒物的主要来源有三个途径:流动相、被测样品和仪器系统部件的磨损物。

1、流动相

如果流动相均由高效液相色谱级溶剂组成,流动相没有必要过滤。这是因为高效液相色谱级的有机溶剂,例如乙腈、甲醇等,在制造的工艺过程中都已经过了0.2μm微孔滤膜过滤。同样的,无论你是买的HPLC级的水还是在实验室使用超纯水净化系统制备的水,最后一步也是通过0.2μm微孔滤膜。

2、被测样品

液相系统中的第二个颗粒物来源是被测样品。一些实验室在将他们的样品放置在自动进样器盘(或手动进样)以前,所有样品都先通过一个0.45μm针筒式过滤器过滤。这是一个有效除去被测样品中颗粒物的方法。但这个过程存在的问题:使用了针筒式过滤器,通过过滤器的被测样品,总会有或多或少的损失。主要来自这样几方面:过滤器滤膜的吸附、过滤器滤出的颗粒物上的吸附、针筒式滤膜过滤器与针筒连接处的渗漏等。在实际分析中,一般检测每一组样品会带一个外标,所以,只要最终检测时得到的信噪比能满足检出限要求,可将这步视为系统误差而忽略。

3、仪器系统部件的磨损物

在HPLC系统中颗粒物的另一个主要来源是输液泵密封垫和进样阀旋转轴的磨损。当然,输液泵的密封垫和旋转轴的密封垫磨损将增加更多研磨物在流动相中,加速对这些部件的损伤。无论颗粒物源于何物,实验时都要将其除去。

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