+关注

分析测试百科网 > 行业资讯 > 技术原理

临床生化自动化分析（六）

2021.5.15

二、操作方法

（一）操作前的各项检查

1．正常开机以后，检查冲洗用水装置是否正常、各项分析试剂是否充足、各种清洗剂是否足够，以及样品针、试剂针和搅拌棒是否清洁。

2．确认要进行校准的项目，确认要做的质控批号及项目，以及校准品、质控品是否足够。

3．进行光度计自检来确认光路与检测系统是否处于正常工作状态。

（二）校准

分析仪在样品分析之前都要对该分析项目进行校准（也称定标），得出一个该项目的校准系数（K）。校准前首先必须在反应程序里设定有关校准的参数，如校准液的代码、位置及浓度值等。执行校准程序，检测得到该校准品的吸光度值，再根据校准浓度计算校准系数（K=校准品浓度/校准品吸光度）。

1．校准方式有单点校准、两点校准和多点校准，大多数检测项目的校准曲线呈直线且通过原点，用单个浓度的校准液即可，若校准曲线呈直线但不通过原点，则需用两个浓度的校准液做两点校准；当校准曲线不呈直线而为真正的曲线时，应做多点校准，并按其线形选择不同的曲线方程进行拟和，如双曲线、抛物线、幂函数、指数函数、对数函数等方程等，多数生化分析仪已设置有数种曲线方程可将多点校准的结果自动进行数据处理，得到曲线拟和方程，样品的检测吸光度便可通过此方程计算出结果。

2．对校准的要求

（1）选择合适（配套）的校准品，包括校准品数目、类型和浓度。

（2）如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质。

（3）确定校准的频度。根据检测项目方法和试剂的稳定性不同而确定不同的校准频度，如每日校准、每周校准、每月校准、每两月校准等，至少每六个月进行一次校准。

（4）如有下列情况发生时，必须进行校准：①改变试剂的种类，或者批号更换了。如果实验室能说明改变试剂批号并不影响结果的范围，则可以不进行校准。②仪器或者检验系统进行一次大的预防性维护或者更换了重要部件，这些都有可能影响检验性能。③质控反映出异常的趋势或偏移，或者超出了实验室规定的接受限，采取一般性纠正措施后，不能识别和纠正问题时。

（三）质控品测定

质控是保证检测结果可靠性的一个重要手段，因此每批样品的分析测定均应该有质控样品同时监测。关于分析仪的批测定，是指一批样品从开始测定到完成测定后停止的整个过程。其中如果进行了添加或更新试剂、进行了有可能改变吸光度的维护等操作，均应进行一次质控样品的检测，以便及时监测到分析系统的改变。

所有分析仪都已设定或固化了有关质控的分析程序，①设定有关质控参数，如每个质控品的批号、靶值和标准差；②选择质控图的方式，如均值－标准差质控图；③质控结果的统计分析，分析仪会保存每次测定的质控结果，并对其进行统计，以列表或质控图的形式在屏幕上显示。可根据质控结果在质控图上的位置判断其是否在控。如果判为失控则应从试剂、质控品、校准品和分析仪等几方面寻找原因。通过对质控结果的分析，也可以了解某项目的分析精密度和准确度的改变。

（四）检测项目的输入与测定

1．项目输入

（1）逐项输入：每份样品可以任选分析仪中已设置的且试剂室内已预置试剂的项目中的一项、几项或全部项目。

（2）项目组合输入：把与疾病相关的检验项目组合在一起，进行组合检验，这有利于方便病人，有利于疾病的诊断和预后分析，同时也简化了分析操作，提高分析效率。

（3）批量输入：对于有连续相同测定项目的样品，可使用批量输入的方法。

2．进行测定多数全自动分析仪的操作非常方便，在开始测定画面，输入该批第一个样品的样品号，分析仪即会自动逐个地对样品进行测定。一般在开始画面还有选择：①是否需要对结果超过设定的线性范围、超过允许的吸光度上限等的样品自动进行重复测定；②测定结果是否需要按照已设定的打印格式自动打印与测定结果有关的选项。

3．急诊检验几乎所有全自动生化分析仪都具备"急诊优先"的功能，仪器留有急诊样品的分析位置或专用样品架以及急诊分析的专用编号。一旦在急诊样品位置上放置了样品，并设定了急诊检验的项目，分析仪就会在常规样品的测定过程中，优先安排对该样品进行分析测定。

（五）样品的减量与预稀释方式

当样品中待测物浓度很高时，其结果往往会超过该项目的线性范围上限。此时分析仪一般会进行自动减少样品量重新测定。分析仪在结果计算时会自动按照样品量的减少比例进行计算。样品的预稀释方式是指在分析过程中仪器首先对样品做自动稀释，然后进行测定。操作过程是，首先由样品针吸取一定量样品，加入反应杯，然后反应杯旋转至加试剂位置，由试剂针吸取稀释液加入已取样品的反应杯，由搅拌针进行搅拌混匀，当再次旋转至取样位置时，由取样针在已稀释的反应杯里吸取已稀释的样品，加至另一个反应杯。前一个反应杯作为预稀释样品用，后一个反应杯将加入试剂产生化学反应用于测定。样品预稀释的优点在于，稀释过程能自动化进行，能使用到高达100倍或更高的稀释比例。但是每进行一次样品预稀释需占用3个取样周期(sampling cycle)，使分析速度减慢。

（六）分析仪的维护

分析仪的常规维护(maintenanc)是保证分析仪能够正常运行的重要手段。分析仪要严格根据操作手册的要求进行维护，一般包括每天维护、每周维护、不定期维护等几方面。

1．每天维护 ①清洗样品针，试剂针，特别是搅拌棒容易缠上纤维蛋白，是最常见的交叉污染源。②加试剂。③加清洗剂。

2．每周维护 ①执行比色杯清洗程序对比色杯进行清洗。这是由于比色杯经过反复使用后，会在比色杯内壁附有用常规方法难以彻底冲洗的物质，这些物质会引起交叉污染，通过使用专用的反应杯清洗剂能比较彻底地对这些附着物进行清洗。②对比色杯进行空白吸光度检查，以了解比色杯经过一段时间使用后透光性的改变情况，以及光路系统的情况。③对于用恒温水浴方式进行保温反应的仪器，要对恒温水槽进行清洗。

2．不定期维护是指对一些易磨损的消耗部件进行检查与更换。①检查进样注射器是否漏水，检查各冲洗管路是否畅通，检查各机械运转部分是否工作正常。②比色杯是否需要更换。③光源灯是否需要更换。

（七）分析仪数据连网
分析仪的数据连网是指分析仪与实验室网络系统之间分析数据的互传与共享。连网的实现是通过分析仪的数据接口以及接口软件来完成，通过连网，能使来自分析仪的结果数据在网络软件的强大功能下得到进一步的处理，如报告单的格式（形式）更加为医生与患者所接受；患者的信息与对应的检验结果能长期保存；结果的分析与管理更为完善。

三、自动化分析与手工操作的比较

与手工法相比，自动化分析具有许多优点，但也存在一些缺点。

（一）优点

1．检测速度快。

2．检测灵敏度高由于分析仪采用了高灵敏的发光二极管等检测器，使可检测的吸光度达1.0-3.0甚至以上，多数在2.5以上，且吸光度可精确到0.0001。因而在符合郎伯－比尔定律的前提下，线性上限提高。

3．检测准确度高分析仪能全过程检测吸光度，因而能准确地判断终点；使终点法结果准确，能做连续监测法使酶活性检测更准确，以及各种自动监测判断功能使检测结果的准确性提高。

4．检测精密度高分析仪尤其是高档分析仪，其取样品和加试剂的精度高，人为误差小，各类偶然误差也小，使检测精密度大大提高。

5．样品和试剂用量减少样品用量减少的主要好处是在同样采血量的前提下，可检测项目增多；试剂用量减少则大大降低了试剂成本。

6．其他 ①能精确地控制反应时间，这对于连续监测尤其重要。②能精确地控制反应温度，这对酶促反应特别重要。③能进行复杂的结果计算，如非线性计算，使非线性的检测项目如载脂蛋白能得到准确测定。

（二）缺点

1．选择次波长较困难因分析仪无连续波长可选，因而选择合适的次波长有时很困难。

2．操作时间受限如各检测项目加试剂时间只能统一固定在2到3个时间点，总反应时间只能固定在10min或15min等。

3．操作复杂性受限 ①加试剂的次数受限制，多数只能加1到2种试剂即单试剂法或双试剂法，因而有些检测方法无法在分析仪上测定，如改良J-G法测定血清胆红素。需加三次或以上试剂的检测项目就无法进行自动化分析。②无法做复杂的操作如检测过程中的离心、过滤、萃取、煮沸等步骤，使有些检测项目无法实现自动分析。③选择和改变反应温度困难。

4．样品量/试剂量的比例受限制由此影响了某些检测项目的最低检测限和线性上限。

5．做参考方法受限制由于操作复杂性受限，以及反应过程中发生的现象难以观察，不能中断操作过程做一些灵活的操作改变等，因此操作复杂的参考方法一般由手工操作。

6. 仪器维护和保养较复杂。

互联网

喜欢作者我要约稿