小鼠免疫实验_ 用电泳分离的抗原进行免疫
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 将含 10～50 μg 目的蛋白抗原的蛋白质混合物上样于适当的 SDS 变性分离胶并电泳。 2. 将胶浸泡在冷的 0.1 mol/L 的 KCl 中 5～15 min。蛋白质条带会在透明凝胶的背景下出现白色沉淀。用解剖刀或剃须刀切下合适的条带。 3. 在组织研磨机中用最小量的 PBS 研磨凝胶条带。确定连续加入 100 μl 直至研碎的凝胶条带成为液体所需的最小体积。 4. 用包含 10～25μl 抗原的凝胶悬液 200～400 μl 腹腔注射免疫小鼠。 5. 3 周后用包含 10～25μl 抗原的凝胶悬液 200～400μl 腹腔注射强化免疫小鼠。 6. 采血，测定抗体滴度，进行细胞融合试验（见基本方案步骤 4～8）。 展开 |
| 注意事项 | 重复用聚丙烯凝胶免疫小鼠会导致黏附，增加了分离脾脏的难度。 |
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