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关于加德纳杆菌的检测方法介绍

2023.4.09

  标本的收集与处理来自感染妇女的宫颈、尿道或阴道标本,或者可能与上述妇女接触的男性尿道标本。用2支藻酸钙或棉拭子采集分泌物,其中1支拭子直接用于分离培养,另1支用于涂片。

  显微镜检查

  ①湿片法:可见大量脱落上皮细胞内粘附许多细小杆菌或球杆菌,使上皮细胞呈诺齿状而不清晰这种细胞称线索细胞或克鲁细胞(dhuecell)。

  ②染色法:革兰染色后可见粘附于上皮细胞上的大量细菌为革兰阴性小杆菌或染色不定的球杆菌,阴道正常菌群的革兰阳性大杆菌即乳酸杆菌减少或不见。

  胺试验在Gv患者阴道分泌物中滴加100-200g/L的KOH溶液时,可释放出恶臭的鱼腥样气味。

  分泌物pH值测定用pH试纸接触阴道壁或沾取分泌物的拭子,结果pH>4.5.

  荧光抗体技术 Gv 用特异性黄光抗体在直接涂片上作荧光抗体染色镜检。该法非常准确,阳性率比培养法高。

  辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)法 按ELEA常规操作,底物用邻苯二胺,用HRP-SPA液代替常规法中第二抗体,当酶标检测仪测得P/N值≥2.1判为阳性。

  酶测定法用消毒棉拭子取阴道壁分泌物于1ml消毒Dulbecca缓冲液试管中,参照Schoom -maker法进行醇测定,直接观察结果+黄色表示Gv阳性,无色为阴性。

  气相色谱法用气相色谱仪分析Gv患者阴道分泌物中酸碱代谢产物现珀酸盐/乳酸盐比例显著增高。

  PCR技术该方法可特异且敏感地检测Gv致病菌株且不受抗生素药物治疗的影响。

  分离培养 将标本接种分离培养液置35℃、5%CO2环境中孵育48h,用生物梅里埃生产的奈瑟菌属一嗜血杆菌属鉴定卡,将生化值输入“Vitek"仪后,可准确给出Gv的鉴定。

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