抗体酶的制备方法介绍
1、杂交瘤技术
经体内免疫后再进行细胞融合是制备抗体酶的一种传统方法。杂交瘤技术的基本原理是用不能在培养液中生长的但能产生抗体的脾脏细胞，与能在培养液中生长的骨髓瘤细胞进行融合，融合得到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培养，通过选择培养，以获取能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。再把这些细胞单克隆化，即繁殖成母体的同一细胞或形成菌落。这些菌落能够产生单一均匀的抗体，可用于进行单克隆抗体的扩大生产。对这些菌落用酶联免疫吸附法等方法加以筛选。该制备方法的关键是要有合适而稳定的过渡态模拟物作半抗原，以产生与过渡态高度亲和的抗体酶。由于大多数反应过渡态类似物的分子量较低，即所谓的半抗原，他们本身免疫原性很弱，必须与某种载体偶联才能表现免疫原性。本方法所得到的抗体酶的催化能力的高低，在很大程度上取决于化学模型物的设计，现在应用的设计策略包括：诱导和转化设计，反应免疫，“潜过渡态”半抗原设计等等。
2、抗体结合部位修饰法
将催化基团或辅助因子引入到抗体的抗原结合部位，一般可采用两种方法：即选择性化学修饰法和基因工程定点突变法。抗体酶和酶一样也可以用化学修饰的方法加以改造。对抗体酶进行结构修饰的关键，是找到一种吻合的方法在抗体结合位置或附近引入酶的催化基团或辅助基团，如果引入的催化基团与底物结合部位取向正确空间排布恰到好处，就能产生高活力的抗体酶。为提高抗体酶的催化能力，可采用邻近效应，静电催化，应变，功能团催化等方法，在抗体结合位点引入催化基团。基因工程定点突变法是利用位点专一性突变引起抗体结合部位氨基酸的改变，能在抗体结合部位换上有催化作用的氨基酸，进而改变抗体酶的催化效率。目前，定点突变的方法己成为提高抗体酶活性的一种常规方法。
3、克隆免疫反应因子的基因
通过PCR技术克隆出全套免疫球蛋白的可变区基因，建立单独产生重链和轻链的噬菌体文库，然后再通过每个载体中存在的非对称限制位点使它们随机地将基因的轻重链结合，这些含有上百万个高水平表达的轻链和重链片段的文库在大肠杆菌中表达和组装，就可大量制造Fab片断了。这样的文库在保留亲本单克隆的识别和亲和特性的基础上利用了免疫因子的多样性，通过这种方法我们可从上百万种可能性中选择抗体酶。
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综述
