军团菌抗体ELISA检测试剂盒使用说明
1、适用范围
作为一种辅助手段用于定性检测人血清中军团菌总抗，属于体外诊断试剂。在美国仅用于科研。
2、实验原理
微孔板中包被着激活的军团菌抗原，实验过程包含三步
A、待测血清在包被板中的反应。血清中特异性抗体可与包被板中的抗 原结合，洗板除去未结合样品。
B、加入酶联羊抗人IgA/M/G，酶联物可与上步中结合到包被板的抗体反应，洗板。
C、底物液显色反应，通过颜色变化，可判断其抗体的含量。
3、试剂组成
| 名称 | 规格 |
| 微孔条 | 包被军团菌抗原(1-6组) 12 X 8孔 |
| 酶联物 | 1×15ml/瓶标记有HRP羊抗人军团菌IgG/M/A抗体白色盖子 |
| 阳性质控 | 1×0.35ml/瓶 红色盖子 |
| 标准品 | 1×0.5ml/瓶 蓝色盖子 |
| 阴性质控 | 1×0.35ml/瓶 绿色盖子 |
| 样品稀释液 | 1×30ml/瓶 |
| 底物显色液 | 1×15ml/瓶含TMB |
| 浓缩洗涤液（10X） | 1×100ml/瓶 |
| 终止液 | 1×15ml/瓶1M的硫酸 |
4、试剂储存
保存于2-8℃，稀释后的洗涤液可在室温保存一周
5、样品收集和准备
静脉穿刺取血，避免交叉感染，禁止使用溶血，污染血液样品。血液样品在室温下不得超过8小时，2-8℃保存不得超过48小时，如需保存更长时间需在-20℃或者更低的温度下冻存。
6、实验所需材料仪器但本试剂盒未提供
酶标仪
微量移液管10ul和200ul
多通道移液器（50-200ul）
去离子水
塑料洗瓶
加样枪头
量筒
纸巾
7、实验步骤
（1）将试剂盒内各成份平衡至室温。
（2）确定所需的微孔条将其固定在板架上。（1个空白孔，1个阴性质控孔，3个标准品孔，1个阳性质控孔）
（3）按照1：21对样品，阴性质控，标准，阳性质控进行稀释（10ml血清+200ml的样品稀释液）
（4）加入100ul样品稀释液于A1孔作为空白孔，每孔分别加入100ul稀释后的质控，标准及样品。
（6）室温（20-25℃）反应25±5分钟
（7）洗板5次
（8）每孔加入100ul的酶联物
（9）室温（20-25℃）反应25±5分钟
（10）洗板5次
（11）每孔加入100ul的底物液
（12）室温下反应10-15分钟
（13）每孔加入50ul终止液
（14）30分钟内酶标仪读数
观察结果，或者在450nm/620-650nm处读数
注意：洗涤时要反复洗涤五次
8、结果说明
CUTOFF OD值=参比品OD x 相关因子（CF）
CF值在每个试剂盒上注明。
阴性样品：样本OD/CUTOFF OD ≤ 0.90
灰色区域：0.91<样本OD/CUTOFF OD<1.09
阳性样品：样本OD/CUTOFF OD≥ 1.10
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