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立克次氏体的实验室检测介绍

2022.7.11

  1、病原学诊断

  立克次体的培养和染色是其诊断和分类的重要方法,最为经典的是鸡胚接种,也可采用细胞培养。染色方法场采取吉姆萨(giemsa)染色法,直接免疫荧光法(direct immunofluorescence assay,DFA)等,但在非培养条件下很难观察到阳性结果。立克次体病原学检查成本较高且对检测人员及条件要求较高,所以不作为临床检测的主要方法。

  2、血清学诊断

  外斐实验:利用变形杆菌属x19,x2等菌株的菌体抗原代替立克次体抗原,与患者血清进行交叉凝集试验,即可进行检测患者是否还有相应抗体。但该试验由于特异性较差,现已经逐渐被淘汰,但其仍是较经典的立克次体检测方法。

  免疫荧光法:利用免疫荧光探针检测患者体内是否存在相应抗体,以诊断立克次体感染。其中间接荧光法(indirect fluorescence assay,IF)是目前诊断立克次体感染的金标准。

  酶联免疫吸附试验(Elisa):此法具有灵敏、简便、经济的优势,原理为利用高度特异性的免疫反应与高度敏感性的酶促反应相结合,进行抗原或抗体的检测。其表面包被的抗原通常为重组抗原,其灵敏性、特异性和重复性均较高,且能区分 IgG 和 IgM 抗体。

  3、基因学诊断

  聚合酶链反应(PCR):利用荧光定量PCR可以对立克次体进行DNA水平上的检测,它解决了立克次体早期检测的难题,已经在很多研究机构采用。

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