关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

影响小动物活体可见光成像的因素(三)

2020.7.27

然而,在活体成像过程,并不是总能保持各方面因素都达到最佳状态,那么在这种情况下,应该从哪些方面考虑,去获得高质量的图片呢?北京博益伟业仪器有限公司通过对一系列的实验结果分析后,建议:

首先:构建带有强启动子的融合表达蛋白。这是整个活体成像的第一步,也是最重要的一步。从上面的分析可以看出,启动子的强弱对于最终图片的获取影响甚大,强启动子对荧光强度的提高,是任何只从CCD性能方面进行改进所无法比拟的。

另外,值得注意的是,在进行平板预实验时,一定要将整个的实验过程严格控制,包括细胞的个数,底物的浓度以及环境的温度等。其中,环境温度有时会被忽视,但真正的成像是在体内进行的,如果平板实验的温度不准确,不处于酶和底物作用的最佳温度,那么就可能会导致获得结果的不准确性,造成下一步体内注射细胞的偏差,影响实验结果。下图是不同温度下,同样的细胞系,同样的个数获得的结果,可以看到,在温度降低后,能检测到的细胞个数明显减少。而这个结果实际上并不是CCD灵敏度发生了变化,而是环境温度的原因。

2008033106.jpg


第二:在所采用的细胞系无法更改或提高其表达蛋白的能力时,应该考虑延长曝光时间。对于CCD成像来讲,获得的光子信号有一个累加效应,因此,当曝光时间增强时,微弱的光子信号得到了累加,从而可以被检测到。

第三:曝光时间的延长,不仅增加了目的信号,对于噪音也存在一个累加效应,为了避免这种情况,可以适当的增加bin 值,即采用高大像素点进行拍摄,这样获得更多的光子信号,适用于微弱信号的拍摄。

总之,了解了小动物活体成像系统的原理,以及影响成像的一些相关因素后,能够帮助研究人员更容易获得高质量的图片,进而形成一篇好的科学论文。不过,仪器只是论文成功的助因,最重要的决定因素还是在于文章是否具有创新性,以及文章整体内容的丰富程度和含金量,希望我们的仪器能为科研工作者的文章增色许多。

北京博益伟业仪器有限公司 宋莲芬

中国医学科学院实验动物研究所

致谢:

本文的部分实验是在中国医学科学院实验动物研究所完成的,实验的过程中,得到了张连锋老师的大力支持和帮助,在此,对张老师致以诚挚的谢意。


推荐
热点排行
一周推荐
关闭