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小鼠胚胎培养、操作用液配制注意事项

2019.4.23

实验概要

胚胎学实验中需要应用到很多试剂,其中一部分需要实验人员来配制。本Protocol的目的是告知胚胎学实验中常规的试剂配制注意事项。

实验步骤

1.   每次配液应该使用Sigma公司的商品水,配液前要检测水的PH值。

2.   配液时使用表格将每项药品的名称、用量对齐,纸制文件塑封,放在配液者可清晰看见的位置。

3.   培养液、操作液以及激活液所需的所有药品都应该分别称取、分别配液。

4.   CZB培养液应分成高糖和低糖两种,不可将葡萄糖配成储液直接向低糖培养液里添加,不仅造成每次需添加葡萄糖的繁琐,并且会导致培养液渗透压不稳定。

5.   称取试剂、药品时应使用专用称量纸,配液过程中尽量避免用手频繁去摸称量纸,以免污染药品、改变称量纸重量;每次称取新的药品时要使用一张新的称量纸;称量时,使用称量纸光滑的一面称取药品,并将称量纸沿边对折一次即可,保证药品与称量纸有最大的接触面积,对折两次、沿对角线对折都是不正确的。

6.   配液时应使用烧杯作为容器,重要液体的配置需要有专用的玻璃容器,不可与其他用途的玻璃容器混用。添入药品时尽量避免药品沾在容器壁上,使用磁力搅拌棒将添入溶液内的药品迅速搅匀,加入BSA后不要过度搅拌溶液,以免产生泡沫,影响定容。

7.   胚胎培养用的药品应分装,并有专人保管,注意区分不同保存条件的药品,如丙酮酸钠、BSA等需要在4℃保存。

8.   激活液的配置要尽量迅速,不可在室温下放置过久,以免Sr沉淀析出。

9.   青霉素与链霉素每次分装的量一次使用即可,避免反复冻融。

10.PH的测量与PH计的使用:将PH计探头从保护液中取出后,用去离子水冲洗三遍,吸水纸吸干探头上的水;调节PH值时,使用磁力搅棒将溶液搅匀,避免局部过酸或过碱;每次使用完PH计将探头洗净,吸干,更换新的保护液,封口膜封好。

11.配液的过程中不要随意使用非专用的工具,例如:药匙、生锈的剪刀。

注意掌握理论知识,并用来指导实验,认真复习分析化学。


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