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血浆凝血酶原片段1+2检测的检查过程

2022.3.15

  1、将收集到的血浆按1~5编号,各均分为2份,其中1份采用等电点沉淀法提取凝血酶原,另1份采用柠檬酸钡吸附法提取凝血酶原。

  2、等电点沉淀法。血浆用蒸馏水稀释10倍,用5%冰乙酸将其pH调至5.3,4℃静置过夜,3000r/min离心15min,弃上清,沉淀用生理盐水溶解,过滤备用。

  3、柠檬酸钡吸附法。血浆中加入溶液A,体积比为10∶1,4℃搅拌30min,静置30min后,3000r/min离心30min,弃上清。沉淀用溶液B洗涤,3000r/min离心15min,弃上清。重复洗3次。沉淀用溶液C解吸附,4℃搅拌0.5~1h,3000r/min离心15min取上清。上清液用溶液D于4℃透析过夜。3000r/min离心15min取上清液,即为凝血酶原溶液。

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