分析饮料中的2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量（一）
引言
焦糖色素是一种允许使用的着色剂，我国对焦糖色使用量的规定除个别产品外均为按生产需要适量使用，其中规定仅有亚硫酸铵法生产地焦糖色允许使用在碳酸饮料中。而以加氨或其铵盐制成的焦糖（Ⅲ类氨法焦糖和Ⅳ类亚硫酸铵法焦糖）会产生4-甲基咪唑，并且4-甲基咪唑是一种能够诱发肿瘤的高水平的化学物质。
焦糖色素被广泛用于食品以及饮料中，所以4-甲基咪唑的含量监控也是必须被重视的，由于4-甲基咪唑分子极性很大，含量很低，所以如何快速、准确地检测出其含量，就成为人们现阶段研究的重点。目前我国国家标准中只有《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定-高效液相色谱法》，而对于饮料中的4-甲基咪唑则没有相关检测方法。
沃特世（Waters®）公司所提供的整体解决方案，同时来监控饮料中的4-甲基咪唑以及2-甲基咪唑。使用沃特世SPE的固相萃取策略来对于复杂的样品基质进行净化，完成对于4-甲基咪唑以及2-甲基咪唑的提取浓缩，而沃特世HILIC模式的色谱保留，对于极性分子的色谱分离提供完美的效果，最后通过UPLC® H-CLASS PDA以及UPLC/Xevo® TQ MS的分析，完成出色的定性定量工作。
实验条件
样品前处理方案
固相萃取SPE解决方案——Oasis® MCX (3cc/60mg) 小柱净化取3g饮料样品，超声5分钟,后待净化。
活化/平衡
3mL 甲醇 /3mL 水
上3mL样品
清洗 A: 2%甲酸水溶液/B: 100%甲醇
洗脱 5%氨化甲醇
氮气挥干
乙腈:甲醇（9:1）定容
上机分析
ACQUITY UPLC H-CLASS PDA超高效液相色谱分离条件：
色谱柱： ACQUITY UPLC® BEH HILIC Column; 2.1x100 mm,1.7μm
流动相 A： 乙腈
流动相 B： 5mM 甲酸铵
柱温： 35˚C
检测波长： 215nm
进样量： 5μL
运行时间： 3min
梯度表： Time (min) Flow (mL/min) %A Curve
0.00 0.5 80 6
3.00 0.5 80 6
ACQUITY UPLC Xevo TQ MS超高效液相色谱-串联质谱分析条件：
色谱柱： ACQUITY UPLC BEH HILIC Column; 2.1x100 mm,1.7μm
流动相 A： 乙腈
流动相 B： 5mM 甲酸铵
柱温： 35˚C
进样量： 2μL
运行时间： 3min
梯度表： Time (min) Flow (mL/min) %A Curve
0.00 0.5 80 6
3.00 0.5 80 6
实验结果及讨论
1. ACQUITY UPLC H-CLASS PDA分析
混合标准品色谱图
饮料空白样品图
基质添加回收色谱图
2、ACQUITY UPLC/Xevo TQ MS分析
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科技前沿
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技术原理
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焦点事件
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