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关于酶标记抗体实验的结果判定介绍

2022.3.21

  (1)定性及效价滴定:用特异性抗原(或抗体)同酶标记抗体(或抗免疫球蛋白抗体)作双向琼脂扩散试验或免疫电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色,可初步鉴定其活性。最后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定( 见本节 (三)工作浓度的选择)。

  (2)定量和克分子比值测定:可用分光光度计测定(光程1cm)。

  酶量(mg/ml)=OD403nm×0.4

  IgG量(mg/ml)=OD280nm-OD403nm×0.42)×0.94×0.62

  酶量(mg/ml)

   IgG量(mg/ml)

  酶量

  克分子比值=──────── ÷ ─────── = ─── × 4

  40,000

  160,000

  IgG量

  (3)本法标记步骤比较简单,重复性好。缺点是酶的利用率低,一般只有2~4%的酶与蛋白质结合。

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