乙肝血清学标志物定量检测及其临床意义
全球60 亿人口中, 约1/2 人口生活在乙肝病毒(HBV ) 高流行区, 约20 亿人证明有HBV 感染, 3～4 亿人为HBV 慢性感染, 每年约有100 万人死于HBV 感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC)。2005 年12 月10 日中华医学会肝病学分会和中华医学会感染学分会, 中国肝炎防治基金会联合发布我国首部《慢性乙型肝炎防治指南》, 作为诊治乙肝规范性的行动指南。目前国内检测HBV感染血清学标志物应用较多的仍是ELISA 方法。其有以下缺点: 无法定量、灵敏度低, 由检测原理带来的前带现象无法解决, 易污染, 无法完成HBV 感染的动态观察以及低水平HBV 感染指标检测; 免疫胶体金检测技术可大大缩短检测时间, 不需要特殊设备, 操作简单, 但灵敏度欠佳, 假阳性问题难以克服。
随着科学技术的飞速发展, 先进诊断技术不断出现, 时间分辨荧光免疫分析技术(TRF IA ) 是近年发展起来的无环境污染的高灵敏度免疫标记检测技术。乙肝作为常见病毒感染性疾病之一, 临床上常用ELISA 法定性检测乙肝病毒血清学标志物作为诊断HBV 是否感染的依据, 由于钩状效应和敏感性的原因, 常造成HBV 感染的漏诊。临床实践表明, TRF IA 法定量检测乙肝病毒五项血清标志物对乙肝诊治的临床应用越来越显示出其优越性。
1.材料和方法
1.1 标本来源 收集2004年6 月～2005年9月在我院门诊和病房就诊患者血清标本920份,并分别定量和定性检测HBV 血清免疫学标志的全部结果。所有患者均采集静脉血,于当日分离血清, -70℃保存, 并于1 w 内检测。
1.2 试剂 上海新波生物技术有限公司生产的HBsAg, 抗-HBs, HBeAg, 抗-HBe 和抗-HBc 定量检测试剂盒, 批号为20050720; 北京万泰有限公司生产的ELISA 法定性试剂盒, 批号为B20050101;卫生部临检中心提供的乙肝病毒血清学标志物质控品, 批号20050521。
1.3 仪器 Anytest2000 型时间分辨荧光免疫分析仪,DYNEX-MRX 型酶标仪。
1.4 方法 乙肝病毒血清学标志物定量的TRF IA 法和定性的ELISA 法检测, 均严格按照试剂盒各自说明书和《全国临床检验操作规程》中的要求, 两种方法同时分别对不同浓度的标准品和临床标本进行检测。
1.5 结果判定 ELISA 法定性结果参照试剂说明书中的判定方法, 经过本室严格检测, TRF IA 法检测的不同浓度标准品对应ELISA 法定性检测的结果为: 以HBsAg≥1.0 ng/ml, 抗-HB s≥10 mIU/ml, HBeAg ≥0.5 NCU/ml, 抗-HBe≥4.0 NCU/ml, 抗-HBc≥0.6 NCU/ml 判定为阳性, 反之为阴性, 见表1。
1.6 统计学分析 用Excel管理数据库和SPSS11.0 软件统计分析, 方法学间数据比较用χ2检验。
2.结果
2.1 分别用TRF IA 法和ELISA 法对920 份临床血清标本进行检测, 参照表1 中判定乙肝病毒五项血清学标志物定量的阴阳性的方法,所有标本均经AXSYM免疫分析仪微粒子酶免分析法检测HBV感染血清学标志物验证(此验证方法目前是公认的诊断HBV 感染的血清学方法) , 结果对比如表2。
2.2 TRF IA法的敏感性: 对0.2 ng/ml HBsAg,10 mIU/ml 抗-HBs, 0. 05 NCU/ml HBeAg, 2 NCU/ml 抗-HBe和0.2 NCU/ml 抗-HBc标准样品TRF IA法均可检出, 而ELISA法除抗-HBs为±外, 其余均未检出。
-
焦点事件
-
焦点事件
-
科技前沿
