蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法的建立

2020.10.26

TD-MSQS 2020 技术篇五

蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法的建立

学者简介：

武利庆，研究员，中国计量科学研究院前沿计量科学中心蛋白质室主任

杨屹，教授，北京化工大学化学学院

苏萍，副教授，北京化工大学化学学院

近期，中国计量科学研究院武利庆及其合作者杨屹、苏萍等发表系列文章（Anal.Bioanal.Chem. 412(2020)2777-2784、Talanta 178(2018)78-84、Microchem. J. 157(2020)104954），介绍了基于表面等离子共振光谱法和数字ELISA的蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法。

蛋白质是一类重要的生物大分子，免疫分析是其常用的定量分析手段，在测量和质控中不仅关心目标蛋白的含量，更为关注它的活性与功能，其量值的准确对于保证人民大众健康与安全具有重要意义。活性浓度测量手段的匮乏限制了蛋白质产品活性量值的质控与标准的建立。

针对这一难题，作者以G2-EPSPS、人肌红蛋白为例，通过表面等离子共振，在部分传质限制条件下，通过扩散速率等测定直接计算出可被抗体识别的目标蛋白浓度，即免疫亲和活性浓度；或采用寡聚核酸标记抗体，借助邻位连接技术和数字PCR技术，以数字ELISA的方式直接测定样本中目标蛋白的免疫亲和活性浓度。两种方法均无需外部标准品，是一种绝对测量手段。