葡萄糖氧化酶测定实验
基本方案
实验方法原理 |
GOD,β-D-葡萄糖:氧1-氧化还原酶。 酶实验是通过与过氧化物酶(POD)偶联的一个反应序列中进行的,其供体是邻联二茴香胺: |
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实验材料 | 过氧化物酶 |
试剂、试剂盒 | 磷酸钾 邻联二茴香胺 葡萄糖 |
仪器、耗材 | 分光光度计 |
实验步骤 |
实验所需「试剂」具体见「其他」 0.98 ml 实验混合物 0.02 ml 酶样品 记录在 25℃ 时 436 nm 处吸收值降低。ε436=8300 l/(mol·cm)。
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注意事项 | |
其他 |
试剂: 0.1 mol/L 磷酸钾,pH7.0 邻联二茴香胺[二氯化邻联二茴香胺,Mr=317.2, 是固态致癌物,准备 1 ml 25 mmol/L 水溶液(7.9 mg/ml) 并且溶于 100 ml 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0,用 O2 使其饱和 10 min] 0.5 mol/L 葡萄糖(Mr=180.2,90 mg/ml) 过氧化物酶(POD, 从山葵中提取,使用前用 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 120 U/ml)
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