葡萄糖氧化酶的测定
实验方法原理
GOD,β-D-葡萄糖:氧1-氧化还原酶。
酶实验是通过与过氧化物酶(POD)偶联的一个反应序列中进行的,其供体是邻联二茴香胺:
实验材料 过氧化物酶
试剂、试剂盒 磷酸钾邻联二茴香胺葡萄糖
仪器、耗材 分光光度计
实验步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 实验混合物
0.02 ml 酶样品
记录在 25℃ 时 436 nm 处吸收值降低。ε436=8300 l/(mol·cm)。
注意事项
其他
试剂:
0.1 mol/L 磷酸钾,pH7.0
邻联二茴香胺[二氯化邻联二茴香胺,Mr=317.2, 是固态致癌物,准备 1 ml 25 mmol/L 水溶液(7.9 mg/ml) 并且溶于 100 ml 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0,用 O2 使其饱和 10 min]
0.5 mol/L 葡萄糖(Mr=180.2,90 mg/ml)
过氧化物酶(POD, 从山葵中提取,使用前用 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 120 U/ml)
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