ELISA
ELISA是一种经典的测定液体样本中蛋白含量的方法。
该方法优点在于可以准确定量蛋白含量，且测定样本的种类可以多种多样。本期小编带你一起了解ELISA不同样品的制备方法。
细胞培养上清液
移取细胞培养基至离心管中，4℃ 下以 1500 rpm 的速度离心 10 分钟。
立即分装上清液，并将样品储存在 -80℃ 下。尽量减少冻融循环。
细胞提取物
将组织培养板置于冰上。
吸取培养基，并小心地用冰冷的 PBS 清洗细胞一次。
吸取 PBS，每 100 mm 孔板加入 0.5 mL 完全提取缓冲液。
刮取细胞收集在倾斜的孔板中，并移至预冷的试管内。
短暂涡旋，冰上孵育 15-30 分钟。
4℃ 下以 13 000 rpm 的速度离心 10 分钟，沉淀不溶性内容物。
将上清液(即可溶性细胞提取物)等分，置于冰上清洁冷冻管，并将样品储存在 -80℃ 下。尽量减少冻融循环。
条件培养液
将细胞置于完全(含血清)生长培养基中，使细胞增殖至所需的融合水平。
去除生长培养基，并非常小心地用几毫升温 PBS 清洗。重复清洗步骤。
去除最后一次 PBS 洗液，小心地加入无血清生长培养基。
孵育 1-2 天。
移取培养基至离心管中，4℃ 下以 1500 rpm 的速度离心 10 分钟。
立即分装上清液，并将样品储存在 -80℃ 下。尽量减少冻融循环。
牛奶
采集样品，4℃ 下以 10 000 x g 离心 2 分钟。
分装上清液并将样品储存在 -80℃ 下。尽量减少冻融循环。
血浆
将全血收集到含抗凝剂的试管中，例如 BD Vacutainer 电凝管(目录号：363080/363080)或加入 0.1 M 柠檬酸钠至 1/10 最终体积。
4℃ 下以 3000 rpm 的速度离心 10 分钟。
立即分装上清液(血浆)，并将样品储存在 -80℃ 下。尽量减少冻融循环。
尿液
采集样品，4℃ 下以 10 000 x g 离心 2 分钟。
分装上清液，并将样品储存在 -80℃ 下。尽量减少冻融循环。
血清
将全血收集在未处理的试管中，或例如，不含抗凝剂的试管中，如 BD Vacutainer 血清试管（目录号：367812)。
室温下不受干扰地孵育 20 分钟。
4℃ 下以 3000 rpm 的速度离心 10 分钟。
立即分装上清液(血清)，并将样品储存在 -80℃ 下。尽量减少冻融循环。
组织提取物
使用干净的工具解剖目标组织，最好尽快置于冰上，以防被蛋白酶降解。
将组织置于圆底微量离心管中，浸入液氮中“速冻”。在 -80℃ 下存储样品备用，或将样品置于冰上立即匀浆。
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项目成果
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产品技术
