细菌和噬菌体的遗传分析 3

2020.9.07

方法：

苏氨酸亮氨酸叠氮化钠噬菌体乳糖半乳糖链霉素

Hfr：thr⁺ leu⁺ azi^r ton^r lac⁺ gal⁺ str^s

F^-：　 thr^-leu^-azi^s ton^s lac^-gal^-str^r

将 Hfr与F^-同时加入装有完全培养基的大试管中，一定时间取样振荡，洗涤完全培养基，加至添加str的基本培养基（葡萄糖和无机盐）上，只能使杂交后代生长，再把菌落分别转移到只添加azi、T₁、gal或str的选择性培养基上。

azi T₁ gal str

8min－－－－

9min＋－－－

11min＋＋－－

18min＋＋＋－

25min＋＋＋＋

箭头表示基因位点位置先后

大肠杆菌只要有葡萄糖（G）则不利用其它糖类，因此基本培养基中lac⁺ 、lac^-都能生长。选择培养基中gal或lac只用其做碳源，没有其它糖（碳源）。

Hfr菌株的名称测定基因的顺序

A 1 11 10 9 8 7

B 3 4 5 6 7 8

C 4 3 2 1 11 10

D 7 8 9 10 11 1

E 9 8 7 6 5 4

一个菌株只能测少数（如6个）基因，接合管便断裂。

3、转导

转导是以噬菌体作为媒介，把某一细菌的DNA转移到另一细菌，进行基因重组的过程。与杂交的区别：媒介不同（杂交是F因子，转导是噬菌体）。转导分为局限性转导和普遍性转导两类。

3.1、普遍性转导

烈性噬菌体浸染含基因的大肠杆菌，噬菌体DNA进入寄主后环化，水解寄主的染色体，合成的蛋白质外壳误包装了寄主的一段DNA，形成含基因转导噬菌体。当它再浸染含基因的寄主时，在基因的两端双交换，使寄主变为。这种转导供体的任何一个基因都可能被转移，且几率相等，因此称普遍性转导。

3.2、局限性转导

λ噬菌体吸附在大肠杆菌表面，头部线状DNA被注入寄主后，DNA首先环化。游离状态的环化DNA复制（滚环型复制）形成许多线状DNA，然后包装，最后释放出新的噬菌体，大肠杆菌被裂解——裂解生长。环化DNA整合在大肠杆菌染色体的两个基因（bio⁺和gal）之间，整合状态的噬菌体叫原噬菌体（或前噬菌体），或叫没有侵染能力的噬菌体。含有原噬菌体的菌叫溶原化菌。在某些因素作用下原噬菌体还可从大肠杆菌染色体上剔除下来。

λ噬菌体浸染含有bio⁺和gal⁺的大肠杆菌，整合，剔除时偏向一端（不正常的剔除），裂解生长包装，释放出多个转导噬菌体（携带大肠杆菌基因），再浸染gal^-的受体，转导噬菌体进入寄主后环化，形成部分二倍体，表型gal⁺，可发酵半乳糖。λ噬菌体DNA游离不整合，噬菌体不能复制，最后消失，但大肠杆菌表型由gal⁺变为gal^-；λ噬菌体DNA整合到大肠杆菌染色体中，表型为gal⁺，整合的λ噬菌体还可游离出来。 λ噬菌体与大肠杆菌染色体上的gal^-基因交换，新的含gal^-基因的λ噬菌体不能复制最后消失，大肠杆菌表型为gal⁺。

提供基因的叫供体，接受基因的叫受体。提供基因的噬菌体为转导噬菌体，接受了基因的受体叫转导子。仅能转移供体的个别的特定的少数的基因（只能转移整合部位两侧的基因）为局限性，仅能转移少数特定基因的转导叫局限性转导。

3.3、转导的特点

（1）转导是以噬菌体为介导的

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