卵黄抗体制备的实验原理
通过免疫注射产蛋鸡，即可由其生产的蛋黄中提取相应的抗体，并可用于相应疾病的预防和治疗，这类制剂称为卵黄抗体。卵黄抗体在临床上应用较为广泛，其优点是鸡蛋比动物血清更容易获得，且卵黄中抗体含量较高。禽类的免疫器官法氏囊主要控制机体的体液免疫，机体的免疫应答发生后，体液中成熟的骨髓依赖性淋巴细胞受相关免疫信号通路的介导，分化为浆细胞，随即产生大量抗体释放入血液中。血液中的大量抗体逐渐转移入卵黄中，并适量地蓄积。收集到的卵黄抗体，即为通过同一抗原反复刺激后产生的多克隆抗体。卵黄中主要的免疫球蛋白为IgY，其功能与作用类似于哺乳动物血清中的IgG。鸡lgY的分子量约180k Da，由两条轻链和两条重链组成，分子量分别为60~70k Da和22~30k Da，等电点约为5.2。IgY具有较强的耐热、耐酸、抗离子强度和一定的抗酶解能力。
卵黄中的主要成分是蛋白质和脂肪，其比例为1:2。大部分蛋白质都是脂蛋白，存在于卵黄颗粒中，不溶于水，只有卵黄球蛋白（α、β、γ）是水溶性的，而IgY是γ卵黄球蛋白。因此lgY的分离纯化首先需要有效地去除卵黄中的脂类，从水溶性蛋白中分离IgY。目前已建立了诸如PEG、硫酸葡聚糖、天然胶，如海藻酸钠、角叉聚糖或乙醇沉淀等方法初步纯化蛋白质。
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