荧光原位杂交的特点介绍
原位杂交的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。采用荧光标记系统则可克服这些不足,这就是FISH技术。FISH技术作为非放射性检测体系,有以下特点。
优点:
1、荧光试剂和探针经济、安全；
2、探针稳定,一次标记后可在两年内使用；
3、实验周期短、能迅速得到结果、特异性好、定位准确；
4、FISH可定位长度在1kb的DNA序列,其灵敏度与放射性探针相当；
5、多色FISH通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列；
6、既可以在玻片上显示中期染色体数量或结构的变化,也可以在悬液中显示间期染色体DNA的结构。
缺点：
不能达到100%杂交,特别是在应用较短的cDNA探针时效率明显下降。
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