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DNA印迹法的起源和原理

2022.1.17

这种方法最初是由Southern于1975年建立的。

方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。

它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳后照相记录的已知分子量的DNA片段(常用Hind Ⅲ 或EcoRⅠ 降解的λDNA)为标准,精确测量各标准片段与电泳原点之间的距离。以DNA的Log10kb为纵坐标,移动距离(cm)为横坐标,连接各已知条带相应的点,得到一条标准曲线。

然后测量未知条带(放射自显影后获得的特异片段)的移动动距离,在标准曲线上找出相应的Log10kb值,以此计算出其分子量大小。

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