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T淋巴细胞分化抗原检测的操作方法及临床意义

2022.7.11

  操作方法

  1.免疫组织化学染色法

  (1)免疫荧光显微技术:使荧光抗体与细胞表面的T淋巴细胞分化抗原进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,在荧光显微镜下观察。

  (2)免疫金银染色技术:利用胶体金标记T淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体,通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置,加入银显影液,用对苯二酚将银离子还原成银原子,被还原的银原子沉积在胶体金颗粒周围形成“银壳”,最终在光镜下就能看到被放大的黑褐色物质。易于辨别阳性物质,而且能检测微量的抗原。

  2.流式细胞术

  利用荧光素标记的T淋巴细胞分化抗原对应的单克隆抗体做分子探针,在流式细胞仪上检测T淋巴细胞分化抗原的表达,计数T淋巴细胞分化抗原阳性细胞的百分率。

  临床意义

  1.CD1

  在所有胸腺皮质中的胸腺细胞都可以检测到CD1分子的表达,在激活的单核细胞和朗格汉斯细胞中也表达CD1。

  2.CD2

  在T细胞发育的早期阶段表达,由于抗CD2单克隆抗体可以激活早期T淋巴细胞祖细胞,因此CD2抗原可能出现在功能性T细胞受体表达之前,是胸腺细胞激活中可以利用的一种受体。

  3.CD3

  在早期胸腺细胞和成熟T细胞中表达,与T淋巴细胞密切联系,这种抗原经常在急性T淋巴细胞白血病中表达, CD3阳性细胞降低见于如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等自身免疫性疾病。

  4.CD5

  在所有的T细胞上都可以发现CD5抗原,它出现在T淋巴细胞个体发育的早期阶段,在外周血和脐带血中B细胞的一些细胞亚群上也可以检测到CD5的存在。

  5.CD7

  在T细胞个体发育的非常早期就会有所表达,但在T细胞成熟的最后阶段这一抗原会丢失,CD7的功能还不清楚,单核细胞和NK细胞也表达这种CD7抗原。

  6.CD4和CD8

  在抗原激活T细胞时,CD4和CD8作为一种共同的受体,CD4也是人类免疫缺陷病毒的受体。CD4阳性细胞数/CD8阳性细胞数比值降低见于艾滋病、恶性肿瘤等;CD4阳性细胞数/CD8阳性细胞数比值增高见于自身免疫性疾病、变态反应性疾病、器官移植排斥反应等。

  7.CD25

  这种抗原表达在激活的T、B淋巴细胞上。

  8.CD28

  表达在静止的T细胞上,CD28是环孢菌素抵抗的T细胞表面受体,与信号传导途径有关。

  9.CD45

  在所有的造血细胞中都有CD45的表达,缺乏CD45表达的T细胞对各种刺激都不会产生反应。

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