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使用lncRNAi方法通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的肿...（一）

2020.5.25

使用lncRNAi方法通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的肿瘤精准治疗


一箭N雕，lncRNAi实现肿瘤精准治疗

由于引起肿瘤的发生是一个复杂的网络，因此，是否可以通过一次靶向多个OncomiR进行肿瘤治疗呢？今天，小编通过一篇发表在《Molecular Cancer Therapeutics》上的研究，来看看科学家们怎么使用lncRNAi的方法，通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的精准治疗。

研究背景

肿瘤的精准医疗是现在大家关注的热点，针对小分子的肿瘤靶向治疗是热点中的热点。已有研究表明，在肿瘤发生，增殖，转移过程中，存在着大量的异常表达miRNA，称之为“OncomiR”。而这些OncomiRs通过靶向下游mRNA，调控了功能基因的转录后调控。针对肿瘤细胞中过量表达的miRNA，通过miRNA抑制剂或者antisense 序列来人为降低miRNA的表达，是可以抑制肿瘤生长的，已有的研究也是从这个方向多发，抑制某一个miRNA的表达来实现肿瘤治疗。但是，这种方法的局限性在于，由于一个miRNA可以调控多个mRNA，而一个mRNA又受到不同的miRNA的调控，如果只干预了一个miRNA的表达，通常情况下是很难实现对整个调控网络的干预而导致治疗效果不佳。针对这样一个生物学问题，本研究通过lncRNAi的方式，人为合成一条长链非编码RNA，通过同时靶向多个不同的miRNA分子，来实现对HCC的精确治疗。这个方法是否可行呢？让我们一起往下看。

研究结果

1、HCC细胞lncRNAi模型建立与确认
为了同时干预多个OncomiRs，研究人员腺病毒载体构建了同时能靶向12个miRNA(miR21,miR221/222,miR224,miR17-5p/20a,miR10b,miR106b,miR151-5p,miR155,miR181a/181b,miR184,miR1和miR501-5p)，AdSVPE1a-lncR。结果显示，在HepG2,Hep3B,MHCC97H，Huh-7和PLC/PRF /5细胞系中都能表达，而在正常肝细胞系WRL-68和L02中不能表达。HepG2, Hep3B,MHCC97H, Huh-7, PLC/PRF/5 SMMC-7721, MHCC97L细胞中能检测到高的E1a表达，而在BEL-7402, WRL-68, L02细胞中表达很弱。在SMMC-7721和MHCC97L细胞中，AdSVPE1a-lncR的复制水平有成百倍，而在正常细胞系L02和WRL-68中复制水平很低。因此，研究人员成功的将lncRNAi体系在HCC细胞系中实现了表达。

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2、lncRNAi下游靶基因影响鉴定

qRT-PCR检测显示，AdSVPE1a-lncR–mediated lncRNAi表达水平在Huh-7,Hep3B和HepG2细胞中比较高，在PLC/PRF/5, MHCC97H, BEL-7402,MHCC97L, and SMMC-7721相对比较低，而在WRL-68和L02细胞中很低。那么，lncRNAi是否可以影响下游miRNA及靶基因表达呢？结果显示，miR21和miR17-5p在HepG2细胞中显著抑制，相应的靶基因PTEN有明显上调。进一步的荧光素酶检测也表明pGL3-miR21/17-5p在HepG2相比L02细胞表达明显低。因此，lncRNAi可以抑制OncomiRs来保护下游靶基因。

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