关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

蛋白质复合体性质的研究

2019.9.13

  • 方案1 用 FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀

  • 方案2 细胞裂解液中相互作用蛋白的亲和纯化

  • 方案3 多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验

  • 方案4 BN-PAGE 蛋白质分析法

  • 方案5 采用交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑学分析实验

  • 方案6 亚秒级光交联:用水溶性金属复合体监控蛋白质-蛋白质相互作用实验

  • 方案7 位点特异性蛋白质-DNA 光交联法实验

  • 方案8 用 FRET 法分析体内蛋白质的相互作用实验

  • 方案9 用 GFP 嵌合体监控蛋白质-蛋白质相互作用实验

  • 方案10 蛋白质阵列:显微镜玻片的制备

  • 方案11 蛋白质阵列:标记蛋白并通过阵列检测来探究蛋白质-蛋白质相互作用

  • 方案12 蛋白质阵列:标记复合体并通过阵列检测来研究蛋白质-小分子相互作用

  • 方案13 蛋白质阵列:阵列的探针标记方法及激酶-底物相互作用的放射性印迹检测

  • 方案14 蛋白质阵列:用“三明治法”研究复合体溶液

           

实验材料

抗 FLAGM2 单克隆抗体 293 T 细胞

试剂、试剂盒

抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶 甘氨酸 辣根过氧化物酶 IEF缓冲液 裂解缓冲液 NaCl 磷酸盐缓冲液 聚乙烯亚胺 RF10培养基 RPMI 1640 培养基 4 X SDS-PAGE 加样缓冲液 叠氮化钠 胰岛素

仪器、耗材

大型离心机 配有检测 GFP 滤片的荧光显微镜 培养箱 微型离心机 微量离心管 针头 多预装层析柱 摇床 SDS-PAGE 和 2D-IPG SDS-PAGE 仪器 超滤柱

实验步骤


一、用于小范围分析的代谢标记

A14694111395739rrnhxesxppng_small.jpg

二、细胞裂解

B1469411163838wua839de3fpng_small.jpg

三、用于小范围分析的免疫共沉淀

B146941118574078exakchbbpng_small.jpg

四、用抗体层析柱大规模富集 FLAG 标记的蛋白质以及与它相互作用的蛋白质

A1469411222370chw6ab5inspng_small.jpg
B14694112381168pyaggk75zpng_small.jpg

五、用于纯化的蛋白质浓缩

A14694112605308k83wcvh8ypng_small.jpg

六、纯化和鉴定相互作用蛋白

A1469411293657ux5du2rqx8png_small.jpg

            展开


推荐
热点排行
一周推荐
关闭