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光化学法诱导脑缺血(MCAO)动物模型的建立(二)

2020.5.11

1.3.7其他辅助设备和耗材(生产厂家:瑞沃德公司)



2.实验方法


STEP1:

动物麻醉和头部固定:动物经麻醉机诱导进入麻醉,移到定位仪装置进行头部固定和麻醉维持,稳定一会后,使用镊子夹足,测试麻醉的深度,当呼吸平缓,无压足缩回反应时,说明进入实验麻醉中期。另外开启体温维持仪进行实验期动物体温的维持(如图 1)。



STEP2:

左股静脉暴露和空心与孟加拉玫瑰聚乙烯导管输液,导管用线进行固定(如图 2)。



STEP3:

纵向切开头皮(2.0-2.5 厘米)以暴露头骨。为了避免伤口并发症,头骨暴露应进行单一的切割。轻轻刮开颅骨表面的一层膜,使冠状面和矢量中线、前囟点清晰可见,暴露颅骨表面(如图 3)。

STEP4:

波长为 561nm 直径为 8 mm 的激光束立体定向定位在颅骨 AP:0.5 mm、ML:3.5 mm 表面。颅骨被照射 20 分钟。在照射前 2 分钟,经预留导管缓慢注入玫瑰红(0.133?毫升/千克体重,10?毫克/毫升生理盐水)到静脉。注射完后,拔出导管,进行进行皮肤的缝合(如图 4)。



STEP5:

术后,把大鼠放回到笼子,在保温箱中 12 h 光明和黑暗周期和食物和水自由采食的护理。

STEP6:

对照组动物接受相同的实验操作,包括玫瑰静脉注射,但没有激光对颅骨表面进行照明。

3.效果评定

3.1神经功能评分系统测试





3.2生理组织观察

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