酵母转化实验_单链高分子量的担体DNA制备
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 将DNA溶于pH8.0的1×TE缓冲液,终浓度为10 mg/ml。于4℃搅拌过夜。
2. 用一个大的超声探头,在75%的满功率下超声处理DNA 30 s,以降低DNA溶液的粘度。取1 μg DNA在0.8%琼脂糖凝胶上电泳,检查超声剪切后片段大小的分布。如有必要,可重复超声处理,直到获得适当的片段大小分布。片段大小范围在2~15 kb 之间,平均大小约为7 kb 是合适的。
5. DNA沉淀用2×TE缓冲液重悬,最终浓度10 mg/ml。
6. 将担体DNA移至一个Pyrex耐热玻璃烧瓶中,在微波炉中加热煮沸2~3 min。
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