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关于登革病毒的微生物学检查法

2023.5.16

  大多数登革热病例可以根据发热、出血、肝大、休克或血小板减少等症状进行临床诊断。病毒分离、血清学诊断及病毒核酸检查是确切的诊断方法。

  病毒分离

  可用蚊细胞培养上进行病毒分离。一般采集患者发病初期血清接种白纹伊蚊C6/36株细胞分离病毒,亦可经胸内接种巨蚊的成蚊、或脑内接种巨蚊的幼虫进行分离。病毒分离后,可以使用登革病毒血清特异性单克隆抗体,在2周内通过间接凝集实验进行病毒的鉴定。

  血清学诊断

  一般采用血凝抑制试验进行血清学检查。在初次感染中,血凝抑制抗体滴度于感染症状出现后4天内一般低于1:20,但在症状出现后1周至数周内恢复期血清中呈4倍以上的增高,可高达到1:1280。在登革病毒的再次感染中,交叉反应抗体的快速出现为主要特征;血凝抑制抗体滴度在急性期为1:20,在恢复期可升至≥1:2560。如急性期血凝抗体滴度≥1:1280,可判定为新感染。另外,用ELISA法检测患者血清中登革病毒特异性的IgM抗体,有助于登革病毒感染的早期诊断。

  病毒核酸检测

  用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,可以检测病毒的双重或多重感染。即在一对通用引物的作用下同时扩增4个型别的病毒后,经内引物扩增、核酸杂交或酶切分析的方法来进一步鉴定病毒的型别;或者用型特异的引物,直接检测标本中的单一型别病毒。另外,用原位杂交技术可以自DHF患者的白细胞涂片或DSS死者胸腺切片中检出不同血清型登革病毒的RNA。

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