ELISA方法检测HBSAg标准操作规程
一.目的
本SOP规定了HBSAg酶联免疫吸附实验的程序和相应的操作.
二.范围
HBSAg检测
三.责任
实验室操作人员严格按要求执行。
四.定义
无
五.背景
为使实验结果准确无误，需要技术员从第一步开始就按标准操作进行。
六.程序
本程序适用于乙型肝炎病毒抗原（HBSAg）诊断试剂盒。
(一).设备和材料
酶标仪: KHB ST-360
洗板机: KHB ST-36W
精确移液器:单通道可调移液器40-200ul一支
高品质蒸馏水
(二).试剂配制
将浓缩洗涤液加蒸馏水稀释1000ml备用.
（三）.操作流程
1.每孔加入待测标本50ul，设阴阳性对照各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔，质控1孔
2.每孔加入酶结合物1滴（空白对照孔除外），充分混匀,置37℃孵育30分钟，洗板机洗板后扣干。
3.每孔加显色剂A液B液各1滴，充分混匀，置37℃孵育15分钟。
4.每孔加入终止液1滴，充分混匀。
5.用酶标仪读数，取波长450/630nm，先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
（四）结果判定
样品OD值／阴性对照平均OD值≥2.1 判断为阳性,否则为阴性
阴性对照OD值低于0.05作0.05计算,高于0.05按实际OD值计算.
(五)注意事项
1、冷藏环境中取出的试剂盒应在室温平衡30min后方可使用
2、使用前试剂应摇匀，并移去1∽2滴后垂直滴加
3.结果判定必须在反应终止后10分钟内完成.
4.不同批号的试剂不可以混用。
5.待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
6．本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
(六).完成实验
1.处理废弃物品,按照 “传染病检测实验室安全管理作业指导书”要求行.
2.清理消毒工作区。
3.关闭仪器设置,为下次实验做好准备。
（七）质控
1．每次实验必须做外部质控，并将质控值填入质控图。
2．根据质控值的位移，趋势等情况及时纠正实验偏差。
3．如质控值超过正负2S，本次实验应重做。
4．质控血清有明确的的标记,保存在-20℃以下，分装量够一周使用。
5．所有仪器设备定期检查校正，并有记录。
6．所有仪器如有维修必须有维修记录。
（八）记录
1．所有实验的原始记录存档。
2．所有记录应规范登记在册。
七．复查和修订
每年复查，修订一次
八．参考文件
HBSAg抗原诊断试剂盒
九．相关文件
无
十附件
无
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项目成果
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焦点事件
