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高效液相色谱法检测果实中的糖酸和维生素C

2020.1.06

采用高效液相色谱法测定荔枝果肉中可溶性糖、有机酸和维生素C的含量。色谱图分离良好。方法准确、灵敏、回收率高、重复性好。测定荔枝果肉中可溶性糖、有机酸和维生素C,是一种简便、快速、准确的检测方法。

1.材料

荔枝品种为“飞子晓”和“诺米奇”。选择五个开花期相同的妃子笑和诺米彩植物。样品在果实成熟阶段取样,并在卷发锅中带回实验室。用刀片将果皮从假种皮中分离出来,每把皮装在一个袋子里,然后以20℃的时间存放在冰箱里。

2.糖组分的高效液相色谱仪测定

对荔枝进行重称重,在微波炉中浸泡30分钟,加入5毫升90%乙醇匀浆,离心10克000克,15分钟,再加5毫升90%乙醇,再提取一次。上清液于90℃水浴中蒸干,定容至10ml,用0.45um膜过滤lml,检测。建立了5个样品和2个测定重复。

仪器采用高效液相色谱与RID差示检测器。色谱柱为NH2柱(150 mm*4.6 mm)流动相为乙腈:水=7:3,流速为1 mL/min,柱温为35℃,注入体积为10UL标准样品为纯木糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖。

3.高效液相色谱法测定有机酸和维生素C

荔枝假种皮1g用5 mL0.2%偏磷酸盐冰浴机准确提取,10 000 g离心15 min,添加0.2%4mL偏磷酸残留,与培养基混合,溶解至10 mL,用0.45μm滤膜过滤。建立了5个样品和2个测定重复。

色谱柱为C18柱(250 mm×4.6mm),流动相为0.2%偏磷酸,流速1mL/min,柱温35℃,进样量10桶。所用试剂为高级纯丙磺酸色谱标准样品为草酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、马来酸和维生素C。


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