免疫透射比浊法测定乳糜微粒
免疫透射比浊法：
① 关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中，apoA-Ⅰ抗血清效价极低，选购试剂盒时必须注意。如果没有在选购前鉴定抗血清质量的经验，应请有条件的单位鉴定之。
② 上法中标本(血清)稀释200倍是为了便于手工操作(加样100μl)，如有精密加样器，可作20倍稀释(用10μl)。为了适合不同实验室的条件(如不同类型的自动化仪器)，作适当修改时应注意抗原抗体的比例，必须十分注意反应体系中不可有抗原过量，线性上限不可低于2.5g/L。换言之，抗血清用量必须充裕，否则标本中apoA-Ⅰ高水平时测出结果偏低。目前国内某些商品试剂盒不但抗血清效价过低，操作中所定标本用量又过大(如3-5μl)，抗体明显不足，测出结果必然不准确。
③ 为了达到准确测定的目的，apoA-Ⅰ与B比浊测定(终点法)中必须作校准曲线计算结果。一定范围(低标本用量)浓度(X)与浊度(Y)基本上成直线关系，直线回归计算出在Y轴上有一定截距(A值<0.1)，所以用单点校准计算结果偏差较大，使测出结果不能准确反映浓度的高低(高的偏低，低的偏高)。千万不要因为单点法简便而忽略了测定的准确性。无论用何种自动化仪器，必须先试作校准曲线。如果在所用仪器及特定条件下反复测试，回归线的截距不明显时，才能采用单点校准法。标本用量在3-5μl时，即使加大抗血清用量，浓度与浊度也不成直线关系，只能用曲线直线化转换后计算。
④ 主要干扰因素是血清本身的混浊(如高脂血清)，用超离心或脂肪酶水解等标本预处理方法都不实用。用表面活性剂消浊的作用也有限，所以在测定中必须作标本空白管。除了自动分析中可采用两点法外，手工法用单一试剂而不扣除标本空白的做法是错误的。为了减少基质效应对浊度反应的影响，必须用定值血清作校准物。此外，尘埃粒子、比浊皿划痕等干扰也必须排除。
⑤ 有的商品试剂盒(包括某些进口产品)所附校准血清定值不准确，是误差的重要来源。
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