果蔬农药残留检测试剂盒的检测方法
一、试剂保存
配制前均为冷冻保存,有效期18个月(0-5℃冷藏保存为12个月)。
二、试剂配制
缓冲液:取一包用510ml蒸馏水摇匀溶解后常温备用。
底 物:取一瓶加入3.1ml蒸馏水摇匀溶解,用时取100μl,配制后0-5℃冷藏保存。
酶 液:取一瓶加入3.1ml缓冲液摇匀溶解,用时取100μl,配制后0-5℃冷藏保存。
显色剂:取一瓶加入20ml缓冲液摇匀溶解, 用时取100μl,配制后0-5℃冷藏保存。
三、检测样本制备
1、取有代表性的蔬菜除去泥土,用天平称取1g,叶菜取叶片部分,瓜果取皮2g。
2、将菜样剪成25px见方大小置于小烧杯内,加入5ml缓冲液,静置浸泡15分钟(或震荡1分钟)。
3、将烧杯中的浸泡液用移液管吸取上清部分2.5ml移入另一试管内,即为样本提取液。
四、测试
取一支试管加入2.5ml缓冲作为空白对照,然后与各样本提取液的试管分别依次加入
酶 液 100ul 显色剂 100ul( 摇匀,放置15分钟)底物100ul
摇匀后马上倒入比色皿中然后立即放入仪器,按“开始空白分析”键后等待检测结果。(做过对照后,接下来的检测则按“开始样品分析”,但重新开机或更换试剂后需要再做一次空白对照)
注:检测时间为3分钟的空白对照值△AO应≥0.3;当温度低于20℃时应该采取加温措施,以提高数据的准确性;若△AO<0.3,又无条件加温时,空白及样品的酶量可加倍。
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