关于青霉素V钾的物质检查介绍
1、吸光度
取本品，加0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1mL中含1mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在306nm的波长处测定，吸光度不得大于0.33，另取本品，用上述氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1mL中含0.2mg的溶液，在274nm的波长处测定，吸光度不得小于0.50。
2、结晶性
取本品少许，依法检查（通则0981），应符合规定。
3、酸碱度
取本品，加水制成每1mL中含5mg的溶液，依法测定（通则0631），pH值应为5.0～7.5。
4、有关物质
照高效液相色谱法（通则0512）测定，临用新制。
pH6.5磷酸盐缓冲液：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液125mL，加水250mL，混匀，用氢氧化钠试液调节pH值至6.5，再用水稀释至500mL。
供试品溶液：取本品适量，精密称定，加pH6.5磷酸盐缓冲液溶解并稀释制成每1mL中约含青霉素V3.6mg的溶液。
对照溶液：精密量取供试品溶液1mL，置100mL量瓶中，用pH6.5磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀。
系统适用性溶液：取青霉素V钾对照品和青霉素对照品各10mg，置10mL量瓶中，加pH6.5磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀。
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以pH3.5磷酸盐缓冲液（取0.5mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH值至3.5）-甲醇-水（10:30:60）为流动相A，以pH3.5磷酸盐缓冲液-甲醇-水（10:55:35）为流动相B，先以流动相A-流动相B（60:40）等度洗脱，待青霉素V峰洗脱完毕后立即按下表进行线性梯度洗脱，检测波长为268nm，进样体积20µL。
系统适用性要求：系统适用性溶液色谱图中，青霉素V峰与青霉素峰之间的分离度应大于6.0。
测定法：精密量取供试品溶液和对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
限度：供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（1.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（3.0%），小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计。
5、青霉素V聚合物
供试品溶液：取本品约0.4g，精密称定，置10mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。
对照溶液：取青霉素V对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.2mg的溶液。
系统适用性溶液（1）：取蓝色葡聚糖2000适量，加水溶解并稀释制成每1mL中约含0.1mg的溶液。
系统适用性溶液（2）：称取本品约0.4g，置10mL量瓶中，加0.04mg/mL蓝色葡聚糖2000溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。
色谱条件：用葡聚糖疑胶G-10（40~120µm）为填充剂，玻璃柱内径：1.0~1.4cm，柱长：30~40cm，以pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液[0.1mol/L磷酸氢二钠溶液-0.1mol/L磷酸二氢钠溶液（61:39）] 为流动相A，以水为流动相B，流速为每分钟1.5mL，检测波长为254nm，进样体积100~200µL。
系统适用性要求：系统适用性溶液（1）分别在以流动相A与流动相B为流动相记录的色谱图中，按蓝色葡聚糖2000峰计算，理论板数均不低于400，拖尾因子均应小于2.0，蓝色葡聚糖2000的保留时间比值应在0.93~1.07之间。系统适用性溶液（2）在以流动相A为流动相记录的色谱图中，高聚体的峰高与单体和高聚体之间的谷高比应大于2.0。对照溶液色谱图中主峰与供试品溶液色谱图中聚合物峰，与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93~1.07之间。以流动相B为流动相，精密量取对照溶液连续进样5次，峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。
测定法：以流动相A为流动相，精密量取供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，以流动相B为流动相，精密量取对照溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。
限度：按外标法以青霉素V峰面积计算，青霉素V聚合物的量不得过0.6%。
6、水分
取本品，照水分测定法（通则0832第一法1）测定，含水分不得过1.5%。
