关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

细胞铁染色实验

2020.8.10

实验方法原理 骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素(细胞外铁)和幼稚红细胞的铁粒(细胞内铁)在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化铁,即普鲁士蓝反应.


试剂、试剂盒 盐酸溶液亚铁氰化钾溶液碱性复红贮存液复染应用液甲醛


实验步骤


一、 实验试剂:


1. 4%盐酸溶液,小心取浓盐酸(38%)40ml慢慢滴加至冷蒸馏水340ml中,边加边搅拌,此液在室温下保存数月.2. 40g/L亚铁氰化钾溶液,(在室温可保存数月)3. 碱性复红(Basic Fucbsin)贮存液:溶解碱性复红1g于无水乙酸10ml及5%的碳酸溶液90ml以上混匀.4. 复染应用液:加上述碱性复红贮存液3ml于蒸馏水100ml中,在室温保存数天.5. 37%甲醛.


二、 实验操作:


l. 将血片和骨髓片在空气中干燥,将涂片置甲醛蒸气中固定2-3min。


2. 将等量40g/L亚铁氰化钾和4%盐酸溶液混合,新鲜配制加热至约56℃将待检已固定的血涂片或骨髓片放入其中30分钟后取出用流水冲洗。


3. 置复染应用液中复染5min,依次用蒸馏水冲洗,无水乙醇冲洗,蒸馏水冲洗,最后在空气中干燥后用显微镜检查.四. 实验结果判断:铁可染色成蓝色颗粒,小珠及小块。


细胞外铁:先低倍镜观察未完全展开的骨髓小粒,再用油镜观察。


“-”    无蓝色铁粒可见


“+”    有少量铁粒或仅占少铁小珠


“2+”    有多铁粒和铁珠和少数小块


“3+”       有许多铁粒或有铁珠和少数小块.


“4+”    有极多铁粒、铁珠.并有许多小块


细胞内铁:计数100个有核红细胞,记录阳性细胞(胞浆中有蓝色颗粒者)的百分率同时注意细胞内铁颗粒数目,大小、染色深浅等,有无环形铁粒的红细胞.参考值:正常人骨髓涂片中细胞外铁呈少量至较多的铁粒,铁珠、多数人呈“+”,少数人为“2+”


幼红细胞有铁粒的阳性率为12%一14%.多数以中、晚幼细胞为主,大多数阳性的幼红细胞内含1-2个细小而无规律的铁粒,仅少数含3-5个铁粒,一般不见含5个以上铁粒的幼红细胞及环形铁粒幼红细胞.


注意事项


l. 所用器材必须清洁,事先经除铁处理,尤其是载玻片.


2. 亚铁氰化钾-盐酸反应应用液必须临时配制.


3. 作细胞外铁检查时,需用含有骨髓小粒的涂片.


4. 细胞内铁计数应以中. 晚幼红细胞为谁.


推荐
热点排行
一周推荐
关闭