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苏丹黑染色实验

2020.8.10

实验方法原理 苏丹黑(Sudan black B,SB)是一种脂溶性染料,可溶解于细胞浆内的含脂结构中,使胞浆中的脂类物质呈棕黑色或深黑色颗粒。

实验材料 细胞浆

试剂、试剂盒 福尔马林液苏丹黑酒精溶液

实验步骤

一、实验试剂:


1. 福尔马林液


2. 苏丹黑酒精溶液


(1)贮备液:苏丹黑B0.3g溶于100毫升纯酒精中,在室温中经常振摇,数天后完全溶解;


(2)缓冲液:16克酚溶于30毫升纯酒精中,再与含0.3克磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)的 100毫升蒸馏水混合.


(3)染色液:将贮备液60毫升与缓冲波40毫升相混合,过滤可用数周。


3. 70%乙醇


4. 瑞氏染液


三、实验方法:


l. 充分干燥的涂片在福尔马林蒸气中固定5-10分钟;


2. 流水冲洗5-10分钟


3 .置于苏丹黑染色液中浸30分钟.


4. 以70%乙醇迅速清洗.


5. 自来水冲洗1分钟。


6. 瑞氏染色复染。


四、实验结果:


阳性反应是棕黑或深黑色颗粒,定位于胞浆中,粒细胞与单核细胞系列呈阳性反应.粒系中,原粒细胞一般阳性,也可弱阳性,早幼粒以下各期细胞随着成熟而阳性程度逐渐加强,中性粒细胞的颗粒大小均匀,与过氧化物酶颗粒相似;嗜酸粒细胞的颗粒较大,着色偏棕,有泡沫状感,嗜碱粒细胞颗粒大小不等。单核细胞胞浆中颗粒较小,不规则,分布弥散,有的盖于核上,淋巴细胞系列呈阴性反应,红细胞系、类巨核细胞和血小板阴性.


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