姐妹染色单体分化染色实验
| 实验方法原理 | 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷（5-Bromodeoxyuridine：BUdR）的培养基中，当细胞在DNA 合成时，BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷（Thymidine：TdR）被掺入到新合成的DNA中。 在第一个细胞周期时，由于半保留复制的机制，中期染色体的每条染色单体DNA双链都被掺入了BUdR（TB·TB）。 但在第二个周期时，在化学组成上便发生了差别：中期染色单体的两条染色单体中只有一条单体保留了半数无BUdR的旧链，而另一条单体的双链都含有BUdR（TB·BB），当用二苯并咪唑衍生物荧光染料Hoechst 33258染色时，TB链能发出较强荧光，BB链对荧光有淬灭作用发弱光。 由于Hoechst 33258荧光染色消失速度很快，继而人们建立了观察SCD的永久标本法。 其中常用有热磷酸盐处理加Giemsa染色和荧光染料加Giemsa染色（FPG）。 TB链与Giemsa染料亲和力强，与BB链亲和力差，得到结果和用荧光染料染色相一致的、形成深浅不同的差别染色。
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 实验步骤 | 一、BUdR 贮存液的制备 BUdR 5 mg（先用0.5 ml 1 N NaOH 溶解），然后补加蒸馏水至5 ml，即成1000 μg/ml的贮存液，因BUdR遇光会发生分解，贮存液应避光冰冻保存。
1. BUdR 培养液制备
（2）预处理 （3）制片
（2）荧光染色
（5）染色
（3）Giemsa染色10 分钟，也可获得满意的标本。
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| 注意事项 | 1. BUdR是一种强突变剂，使用浓度不宜太高，否则会产生细胞毒性；浓度达每ml·30 μg 时，SCE数目能明显升高； |
| 其他 |
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焦点事件
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