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实时荧光定量PCR后反应体系出现蒸发,怎么解决

2023.8.30

你盖紧了盖子不等于就盖紧了PCR管。可能你用的是国产的PCR管吧。通常国产的质量稍差,本身就是密封不严的。也就是说PCR管口不够严密,盖上PCR管子的盖,也不能完全密封。这样即使你怎么使劲盖,也没有用。要解决蒸发的问题,有两个办法,一个是用进口管,可以有效的减少蒸发,但如果你体系做得太小,比如5微升,那么蒸发可能还是比较明显。另一个办法就是还用你原来的PCR管子,但是把体系加大!比如你原来做15微升,现在改到做30微升,保证即使蒸发了也能够你用!
PCR反应有气泡很可能是因为你把PCR管放入PCR仪之前没有离心!通常我们会瞬离一下,把气泡离掉!PCR反应是不可能产生气泡的,因为只是简单的加热,降温的变化,没有达到沸腾。如果有气泡的话得看你的体系有多大,如果太小,是会有影响的。另外你可以在设置PCR程序是稍微把体系设置大一点,比如你做30微升体系,你就设置成40微升。

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